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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】蓝白斑假阳性的困惑
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513279618

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】蓝白斑假阳性的困惑 已有3人参与

请问一下，蓝白斑筛选出现总出现假阳性的原因是什么？？提出的质粒为什么总酶切不出来？
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1楼 2010-11-01 18:46:42
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hyy2005bne

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-11-03 19:56:36
应该是你的目的基因并没有连接到载体上，提出来的只是空载体。再重新做一次吧，16度连接时间加长一下，我一般都是过夜链接，然后拿出来放4度一会，加强稳定性（我以前不放4度也连上了）。如果提出的质粒酶切不出来，是不是质粒没有提出来。
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2楼2010-11-03 19:54:26
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xiezhenrong

金虫 (正式写手)

北斗星
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
先PCR检测一下有没有插入目的基因
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海阔凭鱼跃，天高任鸟飞！
3楼2010-11-03 20:00:44
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513279618

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by hyy2005bne at 2010-11-03 19:54:26:
应该是你的目的基因并没有连接到载体上，提出来的只是空载体。再重新做一次吧，16度连接时间加长一下，我一般都是过夜链接，然后拿出来放4度一会，加强稳定性（我以前不放4度也连上了）。如果提出的质粒酶切不出来 ...

谢谢，发现可能是感受态污染杂菌了，thank you
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4楼2010-11-11 18:58:28
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