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[交流]
【求助/交流】蓝白斑筛选问题
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我用的是DH5α甘油菌和PUC19做蓝白斑筛选，做了几次实验，（培养基是LB固体培养基，内含氨苄抗生素，等凝固之后在表面涂上X-gal和IPTG，涂好后且在一天内使用，不会久存），发现克隆细胞没有蓝斑只有白班，我开始以为是连接效率很高以致无自连质粒菌，但是后来拿空质粒转化这个甘油菌，居然也只有白斑没有蓝斑。放在4度冰箱显色几个小时没有变化。这就很奇怪了，按道理来说应该全部是蓝斑才是。请问到底哪里出了问题呢？是实验设计不对么？？ 最后补充一点，那个试剂应该是没有问题的。我新买的，尤其是质粒从不同公司买了两次新的。 [ Last edited by rainwander on 2011-2-27 at 17:20 ] |
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