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sdluqun铁杆木虫 (著名写手)
板砖队长
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[交流]
【求助/交流】蓝白斑筛选 已有5人参与
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| 做TA克隆，Amp/IPTG/X-gal的LB板子上没有长蓝斑，长了10个左右白斑，挑了一下，摇瓶过夜（加入氨苄），次日有6瓶长菌了，提质粒，琼脂糖电泳检测，却没有条带，这是为什么呢？请大家给点意见，谢谢 |
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2楼2010-06-04 15:13:43
fungixx
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ben1147
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fungixx
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lstt09nk(金币+3):感谢分享经验~~ 2010-06-04 18:48:22
sdluqun(金币+5):之前用Takara的做了好几次，什么也没找，我就买了promega的，体系用的就是您说的这个，也是4度冰箱过夜，这次出现了这种情况，哎，我都郁闷的不行了 2010-06-04 22:28:52
lstt09nk(金币+3):感谢分享经验~~ 2010-06-04 18:48:22
sdluqun(金币+5):之前用Takara的做了好几次，什么也没找，我就买了promega的，体系用的就是您说的这个，也是4度冰箱过夜，这次出现了这种情况，哎，我都郁闷的不行了 2010-06-04 22:28:52
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你用的Taq酶应该能在末尾加A吧，不知道你是用的什么T载体，我们用的是promego的pGEM-T easy ，链接体系一般： pGEM-T easy 1 ul 连接酶 1ul 2*buffer 5ul 连接片段 3ul 4℃连接过夜，效率挺高的啊。 [ Last edited by fungixx on 2010-6-4 at 18:22 ] |
6楼2010-06-04 18:19:26
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