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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】蓝白斑筛选什么也不长
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xiaoru2010

[交流] 【求助/交流】蓝白斑筛选什么也不长 已有12人参与

各位高手，我做蓝白斑筛选（AMP、IPTG、GAL），涂了七个板，就有一个上面12小时时就长了一个蓝斑，其余全部空空如也，已经培养20小时了。这是为什么呢？谢谢！
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1楼 2010-05-13 15:10:17
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shengwufenzi

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
AMP加多了
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2楼2010-05-13 18:47:10
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plantaqp

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能与蓝白斑没有关系，转化失败。从连接，感受态等方面找原因
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3楼2010-05-13 18:49:52
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
先看一下抗性，抗生素浓度，之后确定感受态有没有问题
目前不长菌应该不是连接的问题，当然转染有问题也不会长菌，但是全部转染不成功的机率是很小的
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4楼2010-05-13 20:07:51
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nklyw

木虫 (正式写手)
感受态的活性不好吧，还有就是AMP加多了吧，还有就是电转的时候有问题吧
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5楼2010-05-13 20:42:17
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lingn

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
抗生素错了吧
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6楼2010-05-13 21:02:25
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xiaoru2010

引用回帖:
Originally posted by plantaqp at 2010-05-13 18:49:52:
可能与蓝白斑没有关系，转化失败。从连接，感受态等方面找原因

谢谢，请问一般连接多长时间呢？
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7楼2010-05-14 07:28:15
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xiaoru2010

引用回帖:
Originally posted by shengwufenzi at 2010-05-13 18:47:10:
AMP加多了

不就加千分之一的AMP和千分之一的IPTG，千分之二的Gal吗？
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8楼2010-05-14 07:39:16
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shengwufenzi

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
那就是你的抗生素可能污染了。换一下试试
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9楼2010-05-14 12:24:41
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wangxueqin

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
肯定是感受态有问题，我们之前也遇到过这样的问题，换家生物公司订。
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10楼2010-05-14 14:16:44
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