应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】蓝白斑筛选什么也不长
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
172/2返回列表上一页12
查看: 2306  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

plantaqp

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by xiaoru2010 at 2010-05-14 07:28:15:

谢谢，请问一般连接多长时间呢？

时间长短有的说明书 说几分钟就够了，但是从来没试过这么短时间的，我一般有的过夜有时候1个到几个小时，看自己时间的，有时间就让他多练一会。 我如果连接时间比较短，我一般是取一半来转化，另一半过夜连。根据我的经验问题一般不是出在这里。
   我觉得目的片段的质和量很重要，目的片段多多益善，而不是所谓的3：1. 当然目的片段质量要高，我都是胶回收。因为如果目的片段不纯比如含有影响酶活性的东西（试剂盒质量很关键，PCR产物直接连接的话，PCR体系中成分可能有干扰），连接必然受影响。
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2010-05-14 14:38:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoru2010

引用回帖:
Originally posted by plantaqp at 2010-05-14 14:38:56:


时间长短有的说明书 说几分钟就够了，但是从来没试过这么短时间的，我一般有的过夜有时候1个到几个小时，看自己时间的，有时间就让他多练一会。 我如果连接时间比较短，我一般是取一半来转化，另一半过夜连。 ...

受益匪浅呀！多谢仁兄！确实没有回收好，惭愧惭愧
赞一下 回复此楼
12楼2010-05-14 15:39:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amilie030312

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不长斑是结果，可是导致这个结果的可能性太多了。连接转化做没做好，感受态效率是否高，培养基是否合适，抗生素是不是加多了·······每一步出问题了都会不长菌的。
赞一下(1人) 回复此楼
13楼2010-05-14 16:23:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bettyshan

木虫 (正式写手)

梦幻biobrick
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
确定一下抗生素是否加错了，再就是浓度是否正确。
其次，检查一下感受态细胞，最好从比较有名气的公司订购，或者以其公司的菌种自己制作感受态，我一直都是自己做感受态DH5a,转化效率也是蛮高的。注意做好后要先进行验证，阴性、阳性对照，计算一下转化效率等。
如果都没有问题，可能就是连接出现问题了，应该逐项仔细检查。我也有连接转化一个不长的时候，很郁闷。连接转化时也出现阳性对照长得很好，但是我的样品要么不长，要么长得很慢，与阳性不同步。呵呵，不过能找到你想要的就可以了~~

祝顺利噢~~~
赞一下(1人) 回复此楼
我们都是芸芸众生的小人物，相遇相知，都是幸福！
14楼2010-05-14 16:32:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gene001

金虫 (正式写手)

就是个普通教师
可能原因：1、感受态制备效果不好；
               2、要是转化用的是新连接产物（质粒），有可能连接效果很差；
               3、抗生素种类和浓度（按理说不会有这样低级错误发生吧！）。
赞一下 回复此楼
大家共同交流、共同提高！！！
15楼2010-05-16 12:38:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小白兄

金虫 (小有名气)
感受态你们是买公司的？还是自己做啊？我们实验室是自己做的电转感受态
赞一下 回复此楼
时光如流水，匆匆而过。
16楼2010-05-16 12:44:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子火箭兵

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1.感受态细胞的问题  2.做链接转化时步骤出现问题
赞一下(1人) 回复此楼
17楼2010-05-16 13:49:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xiaoru2010 的主题更新
172/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +7 一样YWY 2026-04-05 8/400 2026-04-05 21:20 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +10 Hll胡 2026-04-04 10/500 2026-04-05 20:09 by nepu_uu
[考研] 材料0856 英一数二 323 求调剂 +14 袁sy 2026-04-01 14/700 2026-04-05 18:18 by cql1109
[考研] 一志愿同济大学323分（080500）求调剂 +8 yikeniu 2026-04-01 8/400 2026-04-05 18:15 by cql1109
[考研] 一志愿211生物学280分 求调剂 +4 李rien 2026-04-05 4/200 2026-04-05 18:01 by kk112233
[考研] 080200学硕，机械工程专业277分，求带走！ +7 瓶子PZ 2026-03-31 7/350 2026-04-05 17:49 by liucky
[考研] 考研生物学考A区211，初试322，科目生化和生物综合，求调剂 +6 。。。54 2026-04-03 6/300 2026-04-05 14:54 by JOKER0401
[考研] 调剂 +8 熊二想上岸 2026-04-04 8/400 2026-04-05 05:27 by houyaoxu
[考研] 一志愿郑大0705求调剂 +3 橘十一 2026-04-02 4/200 2026-04-05 00:05 by chongya
[考研] 323求调剂 +8 李佳乐1 2026-04-04 8/400 2026-04-04 22:26 by hemengdong
[考研] 349求调剂 +11 zwjjjjjj 2026-03-31 11/550 2026-04-04 19:52 by 蓝云思雨
[考研] [调剂信息]085408光电信息 求调剂 总分291分数一英一 +3 iz11az 2026-04-02 3/150 2026-04-04 19:09 by 蓝云思雨
[考研] 考研调剂 +4 美丽的youth_ 2026-04-04 5/250 2026-04-04 17:16 by imissbao
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +9 hanamiko 2026-03-30 9/450 2026-04-04 11:04 by 猪会飞
[考研] 本科985，专业0812分336求调剂 +4 莫莫很行 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:31 by zhq0425
[考研] 303求调剂 +9 DLkz1314. 2026-03-30 9/450 2026-04-03 18:34 by ls刘帅
[考研] 专硕 351 086100 也是考的材科基 本科也是材料 +8 202451007219 2026-04-02 8/400 2026-04-03 09:50 by 蓝云思雨
[考研] 266分，一志愿电气工程，本科材料，求材料专业调剂 +10 哇呼哼呼哼 2026-04-01 11/550 2026-04-02 11:31 by lnilvy
[考研] 070300化学279求调剂 +15 哈哈哈^_^ 2026-03-31 17/850 2026-04-01 21:37 by 给你你注意休息
[考研] 合肥区域性重点一本招收调剂 +4 6266jl 2026-03-30 8/400 2026-03-31 18:43 by 6266jl
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭