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xinongfish

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 蓝白斑筛选:培养好的平板为何要在4℃才能使蓝色更明显?已有5人参与

小弟之前做蓝白斑筛选,发现培养好的平板,蓝斑很少,但是也看到有建议说将平板置于4℃(或适当低温下)数小时显色,其中的道理,小弟始终未能摸透,望各位指点一二。
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dshlove

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
蓝斑很少?不应该是白斑很少?毕竟要的事白斑啊,蓝斑少不是有好处么。
2楼2012-07-09 17:44:55
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xinongfish

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dshlove at 2012-07-09 17:44:55
蓝斑很少?不应该是白斑很少?毕竟要的事白斑啊,蓝斑少不是有好处么。

白斑多是有好处,我的实验已经做完,只是这块不太明白,所以想请教一下,为何要放置于4℃,才能使蓝色显示更为明显。
3楼2012-07-10 10:12:24
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dshlove

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-10 13:45:22
我个人理解啊,置于4℃是为了让你的菌落不在生长了。
至于显色和温度没关系,有关系的是时间。因为菌落显色是有一个过程的,所以要放置一段时间,等颜色稳定。这期间是不希望菌落再生长了,所以就放4℃几小时就差不多达到目的了。
4楼2012-07-10 10:40:19
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xinongfish

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by dshlove at 2012-07-10 10:40:19
我个人理解啊,置于4℃是为了让你的菌落不在生长了。
至于显色和温度没关系,有关系的是时间。因为菌落显色是有一个过程的,所以要放置一段时间,等颜色稳定。这期间是不希望菌落再生长了,所以就放4℃几小时就差不 ...

有帮助,谢谢你啊
5楼2012-07-10 23:24:15
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exon2002

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果是时间问题,那不是加长放置时间就行了,不必4度啊。
6楼2012-07-12 09:47:38
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leannele

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我觉得应该是放在黑暗的状态下,显色会明显。X-gal是应该避光的,放在冰箱里,不是因为温度,而是因为避光了。我一般都不往冰箱放,直接避光就可以了。
7楼2012-07-12 10:46:13
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不离不弃1215

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by leannele at 2012-07-12 10:46:13
我觉得应该是放在黑暗的状态下,显色会明显。X-gal是应该避光的,放在冰箱里,不是因为温度,而是因为避光了。我一般都不往冰箱放,直接避光就可以了。

我觉得不对,因为培养的时候培养箱是黑暗的。其实你放在常温下避光是一样的增加时间呀!
8楼2013-02-28 08:50:41
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实心小白菜

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
常温下菌处于生长状态啊,长太久了菌落太大,状态也不好,显色的原理不是那个酶以Xgal为底物反映生成蓝色产物么,放4度让那个半乳糖苷酶和那个Xgal继续反映显色,放个一天半天的确实会效果好很多,一开始没来得及变蓝的白斑,放一天之后基本都会变蓝了。那个显色反映需要时间,毕竟菌体在生长之后才能产生那个酶。
有啥不高兴的事儿,说出来大家乐呵乐呵~
9楼2013-03-01 15:46:15
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