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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蓝白斑筛选：培养好的平板为何要在4℃才能使蓝色更明显？
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xinongfish

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 蓝白斑筛选：培养好的平板为何要在4℃才能使蓝色更明显？ 已有5人参与

小弟之前做蓝白斑筛选，发现培养好的平板，蓝斑很少，但是也看到有建议说将平板置于4℃（或适当低温下）数小时显色，其中的道理，小弟始终未能摸透，望各位指点一二。
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1楼 2012-07-09 16:23:56
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dshlove

木虫 (正式写手)
★
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蓝斑很少？不应该是白斑很少？毕竟要的事白斑啊，蓝斑少不是有好处么。
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2楼2012-07-09 17:44:55
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xinongfish

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dshlove at 2012-07-09 17:44:55
蓝斑很少？不应该是白斑很少？毕竟要的事白斑啊，蓝斑少不是有好处么。

白斑多是有好处，我的实验已经做完，只是这块不太明白，所以想请教一下，为何要放置于4℃，才能使蓝色显示更为明显。
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3楼2012-07-10 10:12:24
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dshlove

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-10 13:45:22
我个人理解啊，置于4℃是为了让你的菌落不在生长了。
至于显色和温度没关系，有关系的是时间。因为菌落显色是有一个过程的，所以要放置一段时间，等颜色稳定。这期间是不希望菌落再生长了，所以就放4℃几小时就差不多达到目的了。
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4楼2012-07-10 10:40:19
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xinongfish

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by dshlove at 2012-07-10 10:40:19
我个人理解啊，置于4℃是为了让你的菌落不在生长了。
至于显色和温度没关系，有关系的是时间。因为菌落显色是有一个过程的，所以要放置一段时间，等颜色稳定。这期间是不希望菌落再生长了，所以就放4℃几小时就差不 ...

有帮助，谢谢你啊
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5楼2012-07-10 23:24:15
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exon2002

铁杆木虫 (著名写手)
★
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如果是时间问题，那不是加长放置时间就行了，不必4度啊。
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6楼2012-07-12 09:47:38
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leannele

金虫 (小有名气)
★
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我觉得应该是放在黑暗的状态下，显色会明显。X-gal是应该避光的，放在冰箱里，不是因为温度，而是因为避光了。我一般都不往冰箱放，直接避光就可以了。
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7楼2012-07-12 10:46:13
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不离不弃1215

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by leannele at 2012-07-12 10:46:13
我觉得应该是放在黑暗的状态下，显色会明显。X-gal是应该避光的，放在冰箱里，不是因为温度，而是因为避光了。我一般都不往冰箱放，直接避光就可以了。

我觉得不对，因为培养的时候培养箱是黑暗的。其实你放在常温下避光是一样的增加时间呀！
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8楼2013-02-28 08:50:41
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实心小白菜

新虫 (初入文坛)
★
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常温下菌处于生长状态啊，长太久了菌落太大，状态也不好，显色的原理不是那个酶以Xgal为底物反映生成蓝色产物么，放4度让那个半乳糖苷酶和那个Xgal继续反映显色，放个一天半天的确实会效果好很多，一开始没来得及变蓝的白斑，放一天之后基本都会变蓝了。那个显色反映需要时间，毕竟菌体在生长之后才能产生那个酶。
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有啥不高兴的事儿，说出来大家乐呵乐呵~
9楼2013-03-01 15:46:15
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