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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蓝白斑筛选的时候不长单菌落
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)

[求助] 蓝白斑筛选的时候不长单菌落

蓝白斑筛选的时候不长单菌落怎么回事啊？之前还做过一次，效果很好啊，这一批再做的时候，就怎么都长不好了，有人说是平板太湿了，得倒好以后放一两天才好使，我也试过了，也不好使啊，这几次做长出的都是在单菌落周围有模模糊糊的小菌落，好奇怪啊！求帮助啊~~~

   对了，我在加抗生素的时候是把三种都在倒板前加进培养基里，有的人是只把Amp加里面，IPTG和X-Gal 是凃板前凃在培养基上，应该是怎么做呢？
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如果不努力，肯定没收获！
1楼 2012-11-14 08:46:37
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
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没入尘埃5: 金币+1, ★有帮助 2012-11-17 08:24:47
说明书上说那种小的菌落是卫星菌落，里面没有质粒，这个是楼主的培养时间有点长，可以在培养的阶段观察一下
我们做的时候只把Amp加里面，IPTG和X-Gal 是凃板前凃在培养基上
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让复杂的事情变简单，简单的事情更简单
2楼2012-11-14 08:58:44
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 太极拳 at 2012-11-14 11:20:18
啥时候都长，只要条件合适就会长，不会说晚上长白天不长、、、

我觉得也是应该这样的，我有个同学说大肠杆菌晚上才长，白天不长，谢谢！
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如果不努力，肯定没收获！
8楼2012-11-14 13:02:58
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-11-14 16:43:48
1：涂平板的时候没有涂干.
2：抗生素浓度不对，AMP一般终浓度100ug/ml.
3：培养基温度太高，加抗生素进去失活了，一般在培养基大约50℃左右加入，根据经验可以在手心碰瓶壁5s不烫手即可加入，或者从灭菌锅拿出来后放入50℃培养箱，过个十几分钟再加入抗生素混匀倒平板.
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没入尘埃5
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
13楼2012-11-14 14:58:52
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)
引用回帖:
45楼: Originally posted by zuihouyizhan at 2013-08-26 09:37:01
一直是放-20℃，有一年了...

那可能是氨苄失效了，你再配点吧，也很好配
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46楼2013-08-27 09:05:16
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普通回帖

没入尘埃5

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 静安jingan at 2012-11-14 08:58:44
说明书上说那种小的菌落是卫星菌落，里面没有质粒，这个是楼主的培养时间有点长，可以在培养的阶段观察一下
我们做的时候只把Amp加里面，IPTG和X-Gal 是凃板前凃在培养基上

我在昨天晚上10点40放进去的，今天早上7点半来了就长模糊了，是时间长吗？还有，大肠杆菌是白天不长吗？它还能感知外界时间啊？
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3楼2012-11-14 10:20:43
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太极拳

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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啥时候都长，只要条件合适就会长，不会说晚上长白天不长、、、
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4楼2012-11-14 11:20:18
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qiuqu_200212

至尊木虫 (知名作家)

无助又无奈

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其实不长菌落可能是没有转进去片段，不能产生抗性，死光光了。
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无奈又无助的天鹅，孤零零
5楼2012-11-14 11:56:35
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 没入尘埃5 at 2012-11-14 10:20:43
我在昨天晚上10点40放进去的，今天早上7点半来了就长模糊了，是时间长吗？还有，大肠杆菌是白天不长吗？它还能感知外界时间啊？...

汗…………没有听说过白天不长的说法哎，我们一般是晚上放进去，早上8点多的时候是单菌落，到了十一点的时候周围就会有卫星菌落出现
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让复杂的事情变简单，简单的事情更简单
6楼2012-11-14 12:37:16
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
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没入尘埃5: 金币+1, ★有帮助 2012-11-17 08:25:27
引用回帖:
3楼: Originally posted by 没入尘埃5 at 2012-11-14 10:20:43
我在昨天晚上10点40放进去的，今天早上7点半来了就长模糊了，是时间长吗？还有，大肠杆菌是白天不长吗？它还能感知外界时间啊？...

极有可能氨苄失效
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jiayoubashaonian
7楼2012-11-14 12:41:47
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by qiuqu_200212 at 2012-11-14 11:56:35
其实不长菌落可能是没有转进去片段，不能产生抗性，死光光了。

其实有菌落，但是菌落周围还有一堆小的菌落，模糊一小片
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如果不努力，肯定没收获！
9楼2012-11-14 13:03:59
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 静安jingan at 2012-11-14 12:37:16
汗…………没有听说过白天不长的说法哎，我们一般是晚上放进去，早上8点多的时候是单菌落，到了十一点的时候周围就会有卫星菌落出现...

这个不知道是怎么了，时间都已经短了，还是这样
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如果不努力，肯定没收获！
10楼2012-11-14 13:05:01
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