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没入尘埃5

金虫 (小有名气)

[求助] 蓝白斑筛选的时候不长单菌落

蓝白斑筛选的时候不长单菌落怎么回事啊?之前还做过一次,效果很好啊,这一批再做的时候,就怎么都长不好了,有人说是平板太湿了,得倒好以后放一两天才好使,我也试过了,也不好使啊,这几次做长出的都是在单菌落周围有模模糊糊的小菌落,好奇怪啊!求帮助啊~~~

   对了,我在加抗生素的时候是把三种都在倒板前加进培养基里,有的人是只把Amp加里面,IPTG和X-Gal 是凃板前凃在培养基上,应该是怎么做呢?
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如果不努力,肯定没收获!
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
没入尘埃5: 金币+1, 有帮助 2012-11-17 08:24:47
说明书上说那种小的菌落是卫星菌落,里面没有质粒,这个是楼主的培养时间有点长,可以在培养的阶段观察一下
我们做的时候只把Amp加里面,IPTG和X-Gal 是凃板前凃在培养基上
让复杂的事情变简单,简单的事情更简单
2楼2012-11-14 08:58:44
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 太极拳 at 2012-11-14 11:20:18
啥时候都长,只要条件合适就会长,不会说晚上长白天不长、、、

我觉得也是应该这样的,我有个同学说大肠杆菌晚上才长,白天不长,谢谢!
如果不努力,肯定没收获!
8楼2012-11-14 13:02:58
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-11-14 16:43:48
1:涂平板的时候没有涂干.
2:抗生素浓度不对,AMP一般终浓度100ug/ml.
3:培养基温度太高,加抗生素进去失活了,一般在培养基大约50℃左右加入,根据经验可以在手心碰瓶壁5s不烫手即可加入,或者从灭菌锅拿出来后放入50℃培养箱,过个十几分钟再加入抗生素混匀倒平板.

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13楼2012-11-14 14:58:52
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)

引用回帖:
45楼: Originally posted by zuihouyizhan at 2013-08-26 09:37:01
一直是放-20℃,有一年了...

那可能是氨苄失效了,你再配点吧,也很好配
如果不努力,肯定没收获!
46楼2013-08-27 09:05:16
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普通回帖

没入尘埃5

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 静安jingan at 2012-11-14 08:58:44
说明书上说那种小的菌落是卫星菌落,里面没有质粒,这个是楼主的培养时间有点长,可以在培养的阶段观察一下
我们做的时候只把Amp加里面,IPTG和X-Gal 是凃板前凃在培养基上

我在昨天晚上10点40放进去的,今天早上7点半来了就长模糊了,是时间长吗?还有,大肠杆菌是白天不长吗?它还能感知外界时间啊?
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3楼2012-11-14 10:20:43
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太极拳

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
啥时候都长,只要条件合适就会长,不会说晚上长白天不长、、、
4楼2012-11-14 11:20:18
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qiuqu_200212

至尊木虫 (知名作家)

无助又无奈

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
其实不长菌落可能是没有转进去片段,不能产生抗性,死光光了。
无奈又无助的天鹅,孤零零
5楼2012-11-14 11:56:35
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 没入尘埃5 at 2012-11-14 10:20:43
我在昨天晚上10点40放进去的,今天早上7点半来了就长模糊了,是时间长吗?还有,大肠杆菌是白天不长吗?它还能感知外界时间啊?...

汗…………没有听说过白天不长的说法哎,我们一般是晚上放进去,早上8点多的时候是单菌落,到了十一点的时候周围就会有卫星菌落出现
让复杂的事情变简单,简单的事情更简单
6楼2012-11-14 12:37:16
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
没入尘埃5: 金币+1, 有帮助 2012-11-17 08:25:27
引用回帖:
3楼: Originally posted by 没入尘埃5 at 2012-11-14 10:20:43
我在昨天晚上10点40放进去的,今天早上7点半来了就长模糊了,是时间长吗?还有,大肠杆菌是白天不长吗?它还能感知外界时间啊?...

极有可能氨苄失效
jiayoubashaonian
7楼2012-11-14 12:41:47
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by qiuqu_200212 at 2012-11-14 11:56:35
其实不长菌落可能是没有转进去片段,不能产生抗性,死光光了。

其实有菌落,但是菌落周围还有一堆小的菌落,模糊一小片
如果不努力,肯定没收获!
9楼2012-11-14 13:03:59
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 静安jingan at 2012-11-14 12:37:16
汗…………没有听说过白天不长的说法哎,我们一般是晚上放进去,早上8点多的时候是单菌落,到了十一点的时候周围就会有卫星菌落出现...

这个不知道是怎么了,时间都已经短了,还是这样
如果不努力,肯定没收获!
10楼2012-11-14 13:05:01
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