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没入尘埃5

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by blackrose8089 at 2012-11-14 12:41:47
极有可能氨苄失效...

氨苄  IPTG  这两种抗生素能反复冻融使用吗?
如果不努力,肯定没收获!
11楼2012-11-14 13:06:09
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 静安jingan at 2012-11-14 08:58:44
说明书上说那种小的菌落是卫星菌落,里面没有质粒,这个是楼主的培养时间有点长,可以在培养的阶段观察一下
我们做的时候只把Amp加里面,IPTG和X-Gal 是凃板前凃在培养基上

那凃IPTG和X-Gal 的时候是不是得等到把它们都凃进去,培养基干了才能凃连接产物啊?
如果不努力,肯定没收获!
12楼2012-11-14 13:07:50
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-11-14 16:43:48
1:涂平板的时候没有涂干.
2:抗生素浓度不对,AMP一般终浓度100ug/ml.
3:培养基温度太高,加抗生素进去失活了,一般在培养基大约50℃左右加入,根据经验可以在手心碰瓶壁5s不烫手即可加入,或者从灭菌锅拿出来后放入50℃培养箱,过个十几分钟再加入抗生素混匀倒平板.

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13楼2012-11-14 14:58:52
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 没入尘埃5 at 2012-11-14 13:06:09
氨苄  IPTG  这两种抗生素能反复冻融使用吗?...

能,但氨苄容易失效

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jiayoubashaonian
14楼2012-11-14 16:26:39
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天空2011

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
其实像你这种状况,一方面要找原因,另一方面就是从新做一次,把用到的试剂什么的全部换了,说不定问题就解决了,别一直等值,浪费时间,说不定就是那种试剂掺杂了其他东西,或者失效什么的

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15楼2012-11-14 17:05:23
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是氨苄失效了,我实验室出现这种情况。怎么做就是没单菌落,新配的氨苄后结果就好了。

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hehe
16楼2012-11-14 19:39:35
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by 没入尘埃5 at 2012-11-14 13:07:50
那凃IPTG和X-Gal 的时候是不是得等到把它们都凃进去,培养基干了才能凃连接产物啊?...

是啊,一般等20分钟后才可以

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让复杂的事情变简单,简单的事情更简单
17楼2012-11-14 23:29:27
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by 没入尘埃5 at 2012-11-14 13:05:01
这个不知道是怎么了,时间都已经短了,还是这样...

这个情况我也不清楚啦…………不好意思啊
让复杂的事情变简单,简单的事情更简单
18楼2012-11-14 23:30:41
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
17楼: Originally posted by 静安jingan at 2012-11-14 23:29:27
是啊,一般等20分钟后才可以...

嗯,好的,谢谢啦!
如果不努力,肯定没收获!
19楼2012-11-15 10:23:46
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
16楼: Originally posted by lvbobo823 at 2012-11-14 19:39:35
是氨苄失效了,我实验室出现这种情况。怎么做就是没单菌落,新配的氨苄后结果就好了。

嗯,好的,谢谢啦!我再试试哈
如果不努力,肯定没收获!
20楼2012-11-15 10:24:16
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