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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蓝白斑筛选的时候不长单菌落
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
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15楼: Originally posted by 天空2011 at 2012-11-14 17:05:23
其实像你这种状况，一方面要找原因，另一方面就是从新做一次，把用到的试剂什么的全部换了，说不定问题就解决了，别一直等值，浪费时间，说不定就是那种试剂掺杂了其他东西，或者失效什么的

嗯，我一直在重做，唉，载体都快用完了
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如果不努力，肯定没收获！
21楼2012-11-15 10:24:48
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
14楼: Originally posted by blackrose8089 at 2012-11-14 16:26:39
能，但氨苄容易失效...

嗯，好的，谢啦，非常感谢
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22楼2012-11-15 10:25:04
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
13楼: Originally posted by Marado at 2012-11-14 14:58:52
1：涂平板的时候没有涂干.
2：抗生素浓度不对，AMP一般终浓度100ug/ml.
3：培养基温度太高，加抗生素进去失活了，一般在培养基大约50℃左右加入，根据经验可以在手心碰瓶壁5s不烫手即可加入，或者从灭菌锅拿出来后 ...

凃平板的时候凃干，是指用涂布器一直凃，凃到吸收为止吗？我们实验室都是凃上以后先在培养箱里正置一段时间，再倒过来
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23楼2012-11-15 10:26:43
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

引用回帖:
23楼: Originally posted by 没入尘埃5 at 2012-11-15 10:26:43
凃平板的时候凃干，是指用涂布器一直凃，凃到吸收为止吗？我们实验室都是凃上以后先在培养箱里正置一段时间，再倒过来...

我们实验室都是一直涂到干，其实你也可以正置一段时间，中途用涂布棒来回重新涂布菌液均匀，再正置，再涂布，重复几次直到完全干，不然整个平板的菌液分布不均，容易成片生长.
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24楼2012-11-15 11:31:22
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)
引用回帖:
24楼: Originally posted by Marado at 2012-11-15 11:31:22
我们实验室都是一直涂到干，其实你也可以正置一段时间，中途用涂布棒来回重新涂布菌液均匀，再正置，再涂布，重复几次直到完全干，不然整个平板的菌液分布不均，容易成片生长....

这样凃板不是得用很长时间吗？好麻烦啊
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25楼2012-11-15 13:15:11
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)
引用回帖:
24楼: Originally posted by Marado at 2012-11-15 11:31:22
我们实验室都是一直涂到干，其实你也可以正置一段时间，中途用涂布棒来回重新涂布菌液均匀，再正置，再涂布，重复几次直到完全干，不然整个平板的菌液分布不均，容易成片生长....

对了，还有一个问题，转化的时候42℃水浴能不能用42℃金属浴代替？还有，自己做感受态细胞的话，是不是只要板上长出了菌，即使没有单菌落也算感受态细胞做成功了？
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26楼2012-11-15 13:17:28
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swxyk01
27楼2012-11-15 13:36:51
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zhoulubin

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
没入尘埃5: 金币+1 2012-11-17 08:26:40
我一般是在倒板的时候放在超净台里吹干，涂板之前稍微离下心富集一下，弃上清，混悬，最多涂200微升，很快就干了
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每个年龄都有其最应该做的事，但只有过了那个年龄自己才知道
28楼2012-11-15 20:42:02
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)
引用回帖:
27楼: Originally posted by swxyk01 at 2012-11-15 13:36:51
29楼2012-11-16 07:52:26
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)
引用回帖:
28楼: Originally posted by zhoulubin at 2012-11-15 20:42:02
我一般是在倒板的时候放在超净台里吹干，涂板之前稍微离下心富集一下，弃上清，混悬，最多涂200微升，很快就干了

那就是一管的转化产物只能凃一板了，那样不会浓度太大吗？会不会长太多啊？
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30楼2012-11-16 07:55:44
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