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没入尘埃5

金虫 (小有名气)

[求助] 蓝白斑筛选的时候不长单菌落

蓝白斑筛选的时候不长单菌落怎么回事啊?之前还做过一次,效果很好啊,这一批再做的时候,就怎么都长不好了,有人说是平板太湿了,得倒好以后放一两天才好使,我也试过了,也不好使啊,这几次做长出的都是在单菌落周围有模模糊糊的小菌落,好奇怪啊!求帮助啊~~~

   对了,我在加抗生素的时候是把三种都在倒板前加进培养基里,有的人是只把Amp加里面,IPTG和X-Gal 是凃板前凃在培养基上,应该是怎么做呢?
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如果不努力,肯定没收获!
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
13楼: Originally posted by Marado at 2012-11-14 14:58:52
1:涂平板的时候没有涂干.
2:抗生素浓度不对,AMP一般终浓度100ug/ml.
3:培养基温度太高,加抗生素进去失活了,一般在培养基大约50℃左右加入,根据经验可以在手心碰瓶壁5s不烫手即可加入,或者从灭菌锅拿出来后 ...

凃平板的时候凃干,是指用涂布器一直凃,凃到吸收为止吗?我们实验室都是凃上以后先在培养箱里正置一段时间,再倒过来
如果不努力,肯定没收获!
23楼2012-11-15 10:26:43
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
没入尘埃5: 金币+1, ★有帮助 2012-11-17 08:24:47
说明书上说那种小的菌落是卫星菌落,里面没有质粒,这个是楼主的培养时间有点长,可以在培养的阶段观察一下
我们做的时候只把Amp加里面,IPTG和X-Gal 是凃板前凃在培养基上
让复杂的事情变简单,简单的事情更简单
2楼2012-11-14 08:58:44
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 静安jingan at 2012-11-14 08:58:44
说明书上说那种小的菌落是卫星菌落,里面没有质粒,这个是楼主的培养时间有点长,可以在培养的阶段观察一下
我们做的时候只把Amp加里面,IPTG和X-Gal 是凃板前凃在培养基上

我在昨天晚上10点40放进去的,今天早上7点半来了就长模糊了,是时间长吗?还有,大肠杆菌是白天不长吗?它还能感知外界时间啊?
如果不努力,肯定没收获!
3楼2012-11-14 10:20:43
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太极拳

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
啥时候都长,只要条件合适就会长,不会说晚上长白天不长、、、
4楼2012-11-14 11:20:18
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