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[求助]蓝白斑筛选不长菌已有1人参与
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之前做过很多次都没出现过这个问题，这次也是按照原来的方法做的，竟然不长菌。载体是天根的pGM-T，感受态是JM109，目的片段500bp左右，也是用天根的胶回收做的。失败后，考虑了连接和感受态细胞的问题。 1.连接的验证 模板：载体试剂盒中的control insert DNA(700bp) 引物：SP6、T7 结果：  2.感受态细胞 本来以为是我的JM109是不是传代出现问题了，用新的JM109做的。 A.连接载体转入CP cell，37度振荡培养1h后，有晕状浑浊出现，涂于LB+（表面涂有IPTG16μl，X-gal 40μl)平板培养基，37度培养15小时，不长菌。 B.单独的CP cell分别涂了LB+和LB-两个平板培养基，两个都长菌了，涂LB-的长的比LB+的多。 真的是特别的郁闷，请大家多多指教！先说声谢谢！！ |
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