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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR电泳图条带问题求助
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dajin

铁虫 (小有名气)

[交流] PCR电泳图条带问题求助

这是我跑完PCR后的电泳图，各位大侠抽时间给分析一下，条带这种情况是什么原因导致的？模板问题，PCR问题，还是什么，谢谢
PCR电泳图条带问题求助
PCR结果.jpg
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1楼 2013-10-09 22:20:07
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

淘淘279

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-10-22 22:53:13
dajin: 金币+1 2013-10-29 09:19:23
你的样品是多大bp的？感觉有两个原因：
1，你的凝胶凝的不均匀
2，你用的凝胶浓度不适宜分离你的样品里的DNA片段大小，改变一下胶的浓度试试看
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10楼2013-10-22 20:17:51
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天使托

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
应该是pcr产物的问题，浓度不够均匀、被污染都有可能；
重新pcr一下看看是否还是一样。
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17楼2013-10-30 00:32:58
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普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
dajin: 金币+1 2013-10-21 09:13:09
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-21 09:49:31
marker很好说明是样品或者电泳的问题。你的情况很少见，越往中间越歪斜。电泳缓冲液是否覆盖了胶面？
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2楼2013-10-09 22:55:55
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jinqimaggie

铁虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
dajin: 金币+1 2013-10-21 09:13:12
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-10-21 09:49:46
我赶脚是胶凝结不均匀 建议跑之前预跑一下空胶
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3楼2013-10-10 05:09:27
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dajin

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-10-09 22:55:55
marker很好说明是样品或者电泳的问题。你的情况很少见，越往中间越歪斜。电泳缓冲液是否覆盖了胶面？

是的，已经完全覆盖。
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4楼2013-10-21 09:12:20
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dajin

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jinqimaggie at 2013-10-10 05:09:27
我赶脚是胶凝结不均匀 建议跑之前预跑一下空胶

嗯嗯。是不是胶制的不好呢
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5楼2013-10-21 09:13:01
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素手就琴

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-10-22 22:53:29
dajin: 金币+1 2013-10-29 09:19:05
dajin: 金币+1 2014-02-10 11:00:27
我觉得是胶的问题，不均匀，或者梳子没插好 深浅不一
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6楼2013-10-22 14:25:07
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yuren2009

木虫 (正式写手)
★
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梳子拔得太早吧？
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7楼2013-10-22 18:02:35
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xhp_1638

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
跑胶时位置没放好，最主要的应该是PCR出现问题！！
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8楼2013-10-22 19:35:27
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不叶珏

铁杆木虫 (正式写手)
★
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个人感觉 燃料加太多
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9楼2013-10-22 19:38:15
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dajin

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xhp_1638 at 2013-10-22 19:35:27
跑胶时位置没放好，最主要的应该是PCR出现问题！！

肯定不是PCR问题
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11楼2013-10-29 09:18:31
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dajin

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yuren2009 at 2013-10-22 18:02:35
梳子拔得太早吧？

半个多小时呢
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12楼2013-10-29 09:18:56
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dajin

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 素手就琴 at 2013-10-22 14:25:07
我觉得是胶的问题，不均匀，或者梳子没插好 深浅不一

这个有可能
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13楼2013-10-29 09:19:14
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dajin

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 淘淘279 at 2013-10-22 20:17:51
你的样品是多大bp的？感觉有两个原因：
1，你的凝胶凝的不均匀
2，你用的凝胶浓度不适宜分离你的样品里的DNA片段大小，改变一下胶的浓度试试看

恩恩，我再试试
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14楼2013-10-29 09:19:36
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xhp_1638

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by dajin at 2013-10-29 09:18:31
肯定不是PCR问题...

那你觉得呢？
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15楼2013-10-29 20:24:52
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liyongliangx

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看MARKER 没有问题，应该不是胶的问题吧，
你这个问题我还真是没有遇到过，
猜测可能是样品自身的问题
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16楼2013-10-29 21:40:28
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stonever

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
电泳的loading buffer  有问题
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18楼2013-11-15 22:32:34
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