应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蓝白斑筛选都是 假阳性
51/1返回列表
查看: 4152  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tayifeita

木虫 (小有名气)

[求助] 蓝白斑筛选都是 假阳性

我用phusion高保真酶扩一个2kb的目的片段，切胶回收后用30微升产物和30微升 taq mix以1比1的比例混合，72摄氏度加A尾20分钟。然后用pcr回收试剂盒回收。接下来用这次回收的目的片段4.5微升，PMD18-T 0.5微升和solution 1 .总共体系10微升酶连过夜。第二天来就做转化。涂在蓝白斑平板上后挑40个白斑进行菌落pcr。用m13引物。都没检测出条带。希望虫友们能帮忙分析下原因

[ Last edited by tayifeita on 2013-9-18 at 16:21 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-09-18 15:22:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tayifeita

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by cj1104 at 2013-10-10 22:39:07
亲蛋，高保真酶一般是不可以直接连接的哈，查无几乎应该都是平滑末端的，不可以连T载体

你们加A是怎么弄得
赞一下 回复此楼
8楼2013-10-14 18:43:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

湘水悠悠

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-18 18:24:59
我最近也是在做一个类似的，也是m13引物，但是是负引物
赞一下 回复此楼
我最喜欢你，因为你让我活的最像自己
2楼2013-09-18 16:29:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tayifeita

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 湘水悠悠 at 2013-09-18 16:29:37
我最近也是在做一个类似的，也是m13引物，但是是负引物

负引物是什么意思？这个应该没有关系的吧
赞一下 回复此楼
3楼2013-09-18 16:38:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

因为吃饭

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-18 18:25:43
假阳性会不会是酶切的原因。
赞一下 回复此楼
辩证。
4楼2013-09-18 17:31:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭