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tayifeita木虫 (小有名气)
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[求助]
蓝白斑筛选都是 假阳性
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我用phusion高保真酶扩一个2kb的目的片段，切胶回收后用30微升产物和30微升 taq mix以1比1的比例混合，72摄氏度加A尾20分钟。然后用pcr回收试剂盒回收。接下来用这次回收的目的片段4.5微升，PMD18-T 0.5微升和solution 1 .总共体系10微升酶连过夜。第二天来就做转化。涂在蓝白斑平板上后挑40个白斑进行菌落pcr。用m13引物。都没检测出条带。希望虫友们能帮忙分析下原因 [ Last edited by tayifeita on 2013-9-18 at 16:21 ] |
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tayifeita
木虫 (小有名气)
- 应助: 6 (幼儿园)
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- 红花: 3
- 帖子: 106
- 在线: 70.6小时
- 虫号: 1719459
- 注册: 2012-03-27
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2013-09-18 16:38:40
4楼2013-09-18 17:31:28
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