| 查看: 2193 | 回复: 7 | ||||
hihe99银虫 (小有名气)
|
[求助]
race pcr问题，没有特异性条带
|
|
生手做race，5'时两次扩增，跑出来的图没有特异性产物，巢氏扩增的第二次结果更是奇怪，都从胶孔开始弥散了，求前辈们指点 图中，1，2，3是第一次扩增，3是阴性对照 4～8是第二次扩增，8是阴性对照，4，6模板分别是1，2；5，7模板是稀释20倍的1，2  1.jpg |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 RACE |
» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有86人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 提取DNA后，PCR电泳无条带
已经有5人回复
- 用简并引物跑PCR跑不出条带，愁死了
已经有24人回复
- 求助师兄师姐~有关于巢式PCR的问题~~help
已经有11人回复
- 单链DNA大小为100np,PCR后跑电泳，条带在200bp左右是怎么回事？求助！！
已经有4人回复
- PCR不出目的条带的原因
已经有12人回复
- 关于克隆技术——pcr产物测序问题
已经有16人回复
- PCR扩增的特异性条带是啥意思？
已经有9人回复
- RT-PCR的cDNA不能扩增出目的条带，只有内参基因能扩增出来
已经有14人回复
- 5 RACE inner-PCR电泳结果无条带，是怎么回事？
已经有4人回复
- PCR产生非特异性带
已经有11人回复
- 关于5‘RACE
已经有16人回复
- PCR后电泳是特异性条带，但测序总是出现结合问题。怎么办？
已经有9人回复
- RT-PCR跑出来的条带没有量效关系怎么办？什么原因
已经有3人回复
- 高GC含量基因片段PCR问题
已经有13人回复
- 关于PCR无结果的原因
已经有20人回复
- PCR目的条带没跑出，但是跑出了特异性很强的单一条带，是什么原因呢？
已经有9人回复
- 3‘RACE inner PCR 电泳结果总是有弥散现象回收条带不成带状什么原因啊？
已经有17人回复
- 3'RACE测序结果求助
已经有11人回复
- TA克隆遇到的问题
已经有10人回复
- RACE实验中的 GC-Rich 问题
已经有14人回复
- 胶回收产物连接转化后菌液PCR电泳条带出现问题
已经有8人回复
- PCR后电泳条带异常
已经有10人回复
- 这样的电泳条带能测序吗？
已经有17人回复
- 【求助/交流】PCR后没有目的条带，有非特异性条带，求解决办法？？
已经有20人回复
- 【求助/交流】pcr结果电泳条带很淡
已经有14人回复
- 【求助/交流】pcr p不出特异性条带
已经有13人回复
- 【求助/交流】（5.20更新）PCR产物电泳没有条带，why?
已经有20人回复
hihe99
银虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1390.5
- 红花: 3
- 帖子: 133
- 在线: 84.6小时
- 虫号: 1464738
- 注册: 2011-10-28
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
2楼2013-09-03 19:42:37
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-09-04 15:22:40
hihe99: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-09-05 14:40:44
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-09-04 15:22:40
hihe99: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-09-05 14:40:44
|
首先建议你用试剂盒自带的验证系统看看是不是整个系统工作正常.因为你没说用的是什么试剂盒,不同的试剂盒效率也不近相同,碰到问题的时候验证一下系统会比较有信心.3''RACE好做,但是5'RACE对扩增用的taq酶要求也很高,你要确保系统每一部分工作都正常. 其次要看看反转录本身有没有问题.可以拿个长点的基因来验证一下. 再次是不是你设计的引物不是太合适作RACE? 或者说你设计的退货温度比较低而实际用的退货温度比较高?如果有3'引物,并且和5'的引物有overlap, 可以扩增一下,看看引物是否可用,反转录是否成功. |
3楼2013-09-04 08:14:02
hihe99
银虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1390.5
- 红花: 3
- 帖子: 133
- 在线: 84.6小时
- 虫号: 1464738
- 注册: 2011-10-28
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
4楼2013-09-04 13:49:07
hihe99
银虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1390.5
- 红花: 3
- 帖子: 133
- 在线: 84.6小时
- 虫号: 1464738
- 注册: 2011-10-28
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
5楼2013-09-04 14:00:04
6楼2013-09-04 15:59:49
7楼2013-09-04 16:01:33
8楼2013-09-22 13:53:53
10