| 查看: 1244 | 回复: 13 | ||
[求助]
有关嗜热蛋白纯化的问题
|
|
各位虫友：我现在在做蛋白纯化。 先介绍一下我的蛋白:我做的蛋白是一种嗜热蛋白，在100℃下还能保持很好的活性。所以就想通过煮蛋白的方式，使杂蛋白变性沉淀下去，而上清中只保留 我自己的目标蛋白。但是现在我不管怎么煮在距离目标蛋白很近的位置总有杂蛋白存在，怎么煮都煮不干净。我的宿主菌是大肠杆菌（rossetta），按说大肠杆菌是不会有嗜热的蛋白存在的，怎么会除不干净呢？有用过这种纯化蛋白的虫友 们能否借鉴一些纯化经验啊！小虫将不甚感激！ 下面附纯化蛋白电泳图一张：  纯化蛋白.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner
已经有0人回复
-
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有281人回复
-
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂
已经有0人回复
-
DMXAA：从血管破坏剂到STING通路研究的关键工具分子 | Biochempartner
已经有0人回复
-
靶向PD-L1的人源化单克隆抗体阿特珠单抗
已经有0人回复
-
"探针之父"(+)-JQ-1如何改变表观遗传研究 | Biochempartner
已经有0人回复
-
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于Hs tag 蛋白纯化后蛋白不纯的问题
已经有6人回复
- 纯化蛋白时关于溶液中咪唑的问题
已经有7人回复
- 蛋白纯化的问题
已经有8人回复
- 蛋白质的Ni柱纯化问题
已经有23人回复
- His Tag融合蛋白纯化
已经有8人回复
- 求助各位大神关于含组氨酸标签蛋白纯化的问题
已经有8人回复
- 蛋白质除盐纯化的问题
已经有14人回复
- 蛋白纯化标签有哪些?
已经有6人回复
- 关于蛋白质纯化柱子的问题
已经有9人回复
- 带HIS标签的可溶蛋白的纯化问题
已经有20人回复
- 关于E-tag标记蛋白的纯化问题！~求助，谢谢帮忙~！
已经有9人回复
- 蛋白纯化遇到问题
已经有22人回复
- AMPK蛋白纯化问题讨论
已经有21人回复
- 蛋白互作必会，GST纯化遇到的问题
已经有13人回复
- his标签蛋白纯化，不挂柱
已经有18人回复
- 蛋白纯化分离问题
已经有19人回复
- 蛋白纯化一个很挠头的问题，请高手指教！
已经有7人回复
- 关于蛋白纯化的问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】蛋白质纯化的疑难问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】蛋白纯化中透析的问题！！
已经有9人回复
- 【求助/交流】关于分子筛纯化蛋白的问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】蛋白纯化后透析及浓缩问题
已经有8人回复
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hraikeyan(myprayer代发): 金币+1, 鼓励应助，热心的顾问分子生物期待更多精彩 2013-07-27 23:58:50
hraikeyan: 金币+3, ★★★很有帮助, 我的蛋白上没有标签，因为它是嗜热的想着煮一下就纯化干净了，所以没有加标签。我之前也跑过空大肠的，空大肠也是有这条条带的。 2013-07-28 09:14:53
感谢参与，应助指数 +1
hraikeyan(myprayer代发): 金币+1, 鼓励应助，热心的顾问分子生物期待更多精彩 2013-07-27 23:58:50
hraikeyan: 金币+3, ★★★很有帮助, 我的蛋白上没有标签，因为它是嗜热的想着煮一下就纯化干净了，所以没有加标签。我之前也跑过空大肠的，空大肠也是有这条条带的。 2013-07-28 09:14:53
| 确定下面的小带一定是杂蛋白吗？某些蛋白在SDS-PAGE上会跑出这样的带来，可能是蛋白有结合辅因或者有修饰造成迁移率不同。你的重组蛋白上有带标签吧，你可以做一下western检查是否两条带都是目的蛋白。 |
2楼2013-07-27 23:25:13
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
3楼2013-07-28 11:10:50
克隆大虾
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 133 (高中生)
- 金币: 6055.9
- 散金: 236
- 红花: 10
- 帖子: 2374
- 在线: 1345.9小时
- 虫号: 93868
- 注册: 2005-09-15
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2013-07-28 22:42:16
5楼2013-07-29 09:40:25
roomofxw
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 13 (小学生)
- 贵宾: 0.005
- 金币: 2882.1
- 散金: 69
- 红花: 7
- 帖子: 755
- 在线: 1020小时
- 虫号: 812203
- 注册: 2009-07-20
- 专业: 生物化学
6楼2013-07-29 15:47:34
克隆大虾
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 133 (高中生)
- 金币: 6055.9
- 散金: 236
- 红花: 10
- 帖子: 2374
- 在线: 1345.9小时
- 虫号: 93868
- 注册: 2005-09-15
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
7楼2013-07-29 17:34:16
8楼2013-07-30 09:14:49
9楼2013-07-30 09:22:31
10楼2013-07-30 09:46:09
50