应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白纯化的问题
91/1返回列表
查看: 1779  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

chinalfx

银虫 (初入文坛)

[交流] 蛋白纯化的问题 已有5人参与

我的过分子筛蛋白纯化几个小时就产生很多的絮状沉淀，蛋白怎么就没了呢？絮状的沉淀是蛋白吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
菲律宾啊菲律宾
1楼 2013-03-04 22:07:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangyhai

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
SDS-PAGE鉴定下就知道了。
赞一下 回复此楼
静心做事。
2楼2013-03-05 08:20:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaojuan1985

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
分子筛之前就沉淀了还是分子筛之后放置了几个小时沉淀？照理说分子筛之后蛋白浓度不大，不太容易沉淀呀。絮状的东西是不是蛋白不好说，我们以前碰到过，透析的时候出现絮状的，跑胶发现那根本不是蛋白，推测是脂类之类的东西。因此，你可以离心一下，检查上清液和沉淀里面哪里有你的蛋白。
再说了，分子筛用的洗脱液都比较温和，还有一点NaCl的存在，照道理来说不会造成蛋白的不稳定呀。
赞一下 回复此楼
3楼2013-03-05 09:35:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

once1015

木虫 (正式写手)
盐浓度低了吧
回复此楼
4楼2013-03-05 16:34:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chinalfx

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gaojuan1985 at 2013-03-05 09:35:59
分子筛之前就沉淀了还是分子筛之后放置了几个小时沉淀？照理说分子筛之后蛋白浓度不大，不太容易沉淀呀。絮状的东西是不是蛋白不好说，我们以前碰到过，透析的时候出现絮状的，跑胶发现那根本不是蛋白，推测是脂类之 ...

跑了胶,是蛋白阿,不知道咋搞的,蛋白放几个小时就全沉掉了
赞一下 回复此楼
菲律宾啊菲律宾
5楼2013-03-05 20:27:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangquanju

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by chinalfx at 2013-03-05 20:27:12
跑了胶,是蛋白阿,不知道咋搞的,蛋白放几个小时就全沉掉了...

我之前有个蛋白也是放置过夜就全部变成乳白色的，因为我的蛋白浓度很高，还有蛋白可能在这个溶液中不稳定，最后我将刚刚分子筛纯化之后的样品进行了测试，设置了不同浓度梯度的甘油，盐，并且放置在室温和冷室。最后发现含高浓度盐（0.5M）和放置室温的蛋白没有沉淀，但是最后我选择了将盐浓度提高到0.5M，蛋白就不再出现之前的情况了！
仅供参考！
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2013-03-05 22:55:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alicelchf

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
温度？如何？蛋白稳定性呢
赞一下 回复此楼
修身、齐家、治国、平天下
7楼2013-03-06 00:24:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chinalfx

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by alicelchf at 2013-03-06 00:24:37
温度？如何？蛋白稳定性呢

4度纯化，蛋白貌似是形成了聚合体
赞一下 回复此楼
菲律宾啊菲律宾
8楼2013-03-07 19:00:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alicelchf

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by chinalfx at 2013-03-07 19:00:06
4度纯化，蛋白貌似是形成了聚合体...

你调一下PH吧，这个是最有可能的影响因素了
赞一下 回复此楼
修身、齐家、治国、平天下
9楼2013-03-07 20:47:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 chinalfx 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 明天应该可查了！？ +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 什么时候开奖？ +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +11 kulium 2026-08-21 14/700 2026-08-24 02:12 by 流流伤
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +16 羊腰板 2026-08-21 17/850 2026-08-23 23:02 by tianxiaochun
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭