应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Q-Sepharose Fast Flow 纯化蛋白遇到的棘手问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
121/1返回列表
查看: 2553  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

william9798

铜虫 (小有名气)

[交流] Q-Sepharose Fast Flow 纯化蛋白遇到的棘手问题

本人需要纯化一个膜蛋白。首先提膜蛋白，然后过Q-Sepharose Fast Flow离子交换柱。目的蛋白PI预测是7.2，我用的缓冲液是20mMTris-cl(pH7.8-8.0, 2.5mM二硫苏糖醇，0.05% Triton x-100). 为什么每次过柱的穿透液紫外吸收峰非常高，而氯化钠梯度洗脱下来的蛋白非常少。感觉蛋白挂不上柱子。请问大家这个是为什么？柱子是新的，电导大概在2-3ms/cm。请大家提供宝贵意见
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-10-18 17:59:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alarace

至尊木虫 (知名作家)
★
william9798(金币+3): 谢谢参与
缓冲溶液可能太接近pI了，换点别的缓冲液
赞一下 回复此楼
2楼2012-10-18 21:58:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackdogzmz

木虫 (职业作家)
★
william9798(金币+3): 谢谢参与
帮顶
回复此楼
3楼2012-10-18 22:41:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

userhung

禁虫 (文学泰斗)
★
william9798(金币+3): 谢谢参与
考虑一下缓冲液哦~~~~~~~~~~~~~
赞一下 回复此楼
5楼2012-10-18 23:01:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

syhorchid

木虫之王 (文学泰斗)
★
william9798(金币+3): 谢谢参与
加点稳定剂吧
回复此楼
8楼2012-10-19 00:51:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chui2004

铁杆木虫 (正式写手)
★
william9798(金币+3): 谢谢参与
同意2楼的！

[ Last edited by chui2004 on 2012-10-21 at 16:49 ]
回复此楼
9楼2012-10-21 16:45:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

豆豆菜虫

金虫 (正式写手)
★ ★
william9798(金币+3): 谢谢参与
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-29 15:51:33
我想问一下你的Q sepharose fast flow 填料溶胀后是什么颜色~~~我这边有一个被我以前的师兄用过的填料  然后是乳白色的有点偏黄~~~然后还有就是杂质特多，还有就是问一下你的那个QFF颗粒是不是很小？？？你能给我说一下你的QFF的一些性状么 谢谢啦~~~
赞一下 回复此楼
10楼2012-10-29 10:48:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

豆豆菜虫

金虫 (正式写手)
还有 QFF本来拿到手的时候是固体的还是液体的啊
赞一下 回复此楼
11楼2012-10-29 10:58:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yongbo_liang

新虫 (小有名气)
★
william9798(金币+3): 谢谢参与
你应该检测你的蛋白是在流出还是在解离部份
如果没有吸附或吸附的很少，你考虑把你的缓冲液PH值提高1个单位
如果还是不行，你考虑换其他的纯化介质如阳离子的或疏水填料尝试一下。
赞一下 回复此楼
12楼2012-10-29 16:24:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
残暴的肉球4楼
2012-10-18 22:55   回复  
william9798(金币+3): 谢谢参与
cl666楼
2012-10-18 23:04   回复  
william9798(金币+3): 谢谢参与
我是小乖乖7楼
2012-10-18 23:07   回复  
william9798(金币+3): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 william9798 的主题更新
121/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 086000生物与医药298调剂求助 +6 元元青青 2026-03-31 8/400 2026-04-04 22:15 by lys0704
[考研] 材料专硕306英一数二 +8 z1z2z3879 2026-03-31 8/400 2026-04-04 22:08 by hemengdong
[考研] 319求调剂 +4 星星不眨眼喽 2026-04-03 4/200 2026-04-04 16:25 by 中飞院空管学院�
[考研] 求生物学专业调剂-332分 +5 云朵遛弯指南 2026-04-04 5/250 2026-04-04 10:05 by rzh123456
[考研] 313求调剂 +3 ～微微凉～ 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:25 by 啵啵啵0119
[考研] 316求调剂 +14 舟自梗 2026-04-01 18/900 2026-04-03 10:28 by linyelide
[考研] 279求调剂 +6 qazplm0852 2026-04-02 6/300 2026-04-03 10:03 by 蓝云思雨
[考研] 338求调剂，一志愿能源动力，外语是日语203 +5 zzz，，r 2026-04-02 5/250 2026-04-03 09:45 by 蓝云思雨
[考研] 312 化工或制药调剂 +8 小小墨123 2026-04-02 9/450 2026-04-03 09:12 by zhouxiaoyu
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-04-02 3/150 2026-04-03 08:44 by yulian1987
[考研] 求调剂！生物与医药专硕 +4 逆转陆先生 2026-04-01 5/250 2026-04-03 08:33 by Jaylen.
[考研] 一志愿a区211，085601-307分求调剂 +13 党嘉豪 2026-03-31 26/1300 2026-04-03 08:33 by 495374996
[考研] 求调剂求调剂 +7 121. 2026-04-02 7/350 2026-04-02 19:15 by dick_runner
[考研] 264分，求任意工科调剂 +4 zzlqwq 2026-03-29 5/250 2026-04-02 17:17 by 何曾几何
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕，求调剂，接受其他专业 +6 what张 2026-04-01 7/350 2026-04-02 16:48 by zzsw+
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-04-02 3/150 2026-04-02 15:06 by cal0306
[考研] 337求调剂 +11 《树》 2026-03-29 11/550 2026-04-02 10:20 by 不吃魚的貓
[考研] 085404 22408 315分 +5 zhuangyan123 2026-03-31 6/300 2026-03-31 13:48 by limeifeng
[考研] 323分 食品与营养调剂 +3 嘿ooo 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:38 by longlotian
[考研] 哈尔滨工业大学材料与化工专硕378求调剂 +3 塔比乌斯 2026-03-30 3/150 2026-03-30 22:55 by 无际的草原
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭