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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 使用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析纯化蛋白后杂蛋白的洗脱
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害虫only

金虫 (初入文坛)

[求助] 使用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析纯化蛋白后杂蛋白的洗脱

如题，使用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析纯化蛋白后，柱子中残留了大量的杂蛋白，请问用什么洗脱液进行洗脱呢？
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1楼2011-06-29 08:53:56
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
amisking(金币+1): 鼓励应助 2011-06-29 18:05:13
害虫only(金币+3): 缓冲液的浓度配多大的？ 2011-07-02 14:43:29
目的蛋白洗脱结束后，可以用2M NaCl的缓冲溶液洗脱，或者用0.5M NaOH洗脱！
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I am not a hero , but I served with heroes！
2楼2011-06-29 16:32:49
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德克士27

金虫 (小有名气)

实验狂人

【答案】应助回帖

★ ★
看天(金币+2): 鼓励回答 2011-06-29 18:26:33
害虫only(金币+1): 2011-07-02 14:43:56
楼上说的很对，如果还是不行，就用70%乙醇或30%异丙醇或1M NaOH清洗！
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我用我有限的青春等你的回心转意！
3楼2011-06-29 17:09:06
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wwyy0818

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

害虫only(金币+1): 2011-07-02 14:44:01
很难洗得掉了，呵呵。个人经验。
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4楼2011-06-29 18:07:30
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

5-100 mm的都可以，不过我用的缓冲溶液是20mm。
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5楼2011-07-03 12:00:32
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-超越beyond

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wlt728 at 2011-06-29 16:32:49
目的蛋白洗脱结束后，可以用2M NaCl的缓冲溶液洗脱，或者用0.5M NaOH洗脱！

0.5M NaOH配完后，在上柱子前是不是要过滤？还是要高温高压？
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6楼2013-06-22 10:44:24
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
silicare: 金币+2, 谢谢参与 2013-07-30 15:10:08
引用回帖:
6楼: Originally posted by -超越beyond at 2013-06-22 10:44:24
0.5M NaOH配完后，在上柱子前是不是要过滤？还是要高温高压？...

需要过滤，不需要灭菌！
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7楼2013-06-23 21:33:29
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1102351850

新虫 (初入文坛)
请问Q Sepharose Fast Flow 阴离子交换层析预处理当中是现加酸还是先加碱呢？
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8楼2013-07-29 19:02:17
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