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His Tag融合蛋白纯化
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| pET-28a/BL21表达得到目的蛋白,部分可溶,部分包涵体,使用Novagen的kit对可溶蛋白进行纯化遇到如下问题:使用BugBuster抽提试剂处理菌液后得到可用于上柱纯化的蛋白溶液置于4度保存过夜均发生沉淀,-20度冻存也出现沉淀(电泳检测过,目的蛋白就在沉淀中),这样还能继续上柱纯化可溶性蛋白吗?怎样才能使蛋白不发生沉淀?有人遇到类似的问题吗?请各位高手指点。 |
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