应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于带his-tag的膜蛋白镍柱纯化
111/1返回列表
查看: 2524  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

丫头7976

铜虫 (正式写手)

[交流] 关于带his-tag的膜蛋白镍柱纯化

ni是与组氨酸残基中咪唑环结合，那么当带有高浓度的咪唑溶液洗脱时，咪唑与his-tag的咪唑环竞争结合ni,所有蛋白才会被洗脱下来，但是存在一个问题，咪唑完全跟ni结合了，第二次上样的时候，带his-tag的蛋白怎么跟镍柱结合呀，因为镍都被咪唑结合着，用什么方法再把咪唑洗脱下来呢？请各位高手指教！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-10-12 17:43:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sfb1020

金虫 (小有名气)
★
丫头7976(金币+1):谢谢参与
丫头7976(金币+1): 每次进完一次样都要再生么 岂不是很麻烦 2011-10-13 08:12:10
柱子需要再生
回复此楼
2楼2011-10-12 18:40:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)
★ ★
丫头7976(金币+1):谢谢参与
丫头7976(金币+1): 灭菌水和乙醇能把镍洗干净吗，得用EDTA，把镍洗下来顺便就把咪唑洗下来了吧 2011-10-13 08:13:40
lstt09nk(金币+1): 鼓励参与 2011-10-13 10:35:26
分别用灭菌水和20%乙醇洗柱子若干次，让柱子再生。
赞一下(3人) 回复此楼
3楼2011-10-12 20:45:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihuan0525

金虫 (职业作家)
★
丫头7976(金币+1):谢谢参与
再生后在过柱子吧
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-10-12 22:06:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doublehelix

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
丫头7976(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+2): 鼓励交流，欢迎常来 2011-10-13 10:35:11
柱子需要再生，先变性，再经过一系列的洗脱等程序...
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2011-10-12 23:18:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sfb1020

金虫 (小有名气)
丫头7976(金币+1): 乙醇是干嘛用的 一般不都是用EDTA洗下来，再重新上镍吗？请指教 2011-10-19 07:55:55
每用一次就要再生一次，用一系列不同浓度的乙醇
赞一下 回复此楼
7楼2011-10-18 12:46:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyonglix99

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
丫头7976(金币+1):谢谢参与
丫头7976(金币+1): 恩 这个我知道 GE柱子说明书有 2011-10-21 08:19:33
silicare(金币+2): 鼓励发帖交流 2011-11-07 14:58:20
有strip buffer 重新去掉咪唑的
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2011-10-19 10:13:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Catherine圆

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+2): 鼓励发帖交流 2011-11-07 14:58:10
Ni-NTA说明书里有洗脱方法呀，11个步骤
赞一下(2人) 回复此楼
9楼2011-11-07 11:00:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

抗体磷酸化

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
怎么不用His,的亲和填料呢？
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2011-12-14 09:31:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rtt0325

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我们就用水洗……好像水洗的时候咪唑浓度降低，它自然就下来了，我们用几次后才会再生一次，这之间都是用水洗洗就成
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2012-01-08 14:34:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
nach6楼
2011-10-12 23:54   回复  
丫头7976(金币+1):谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 丫头7976 的主题更新
111/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-16 3/150 2026-03-16 10:07 by 求调剂zz
[考研] 环境工程调剂 +3 大可digkids 2026-03-16 3/150 2026-03-16 09:09 by DDDddddmm
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +6 一鸭鸭哟 2026-03-14 7/350 2026-03-15 22:12 by Winj1e
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +5 SUICHILD 2026-03-12 5/250 2026-03-14 14:53 by jean5056
[考研] 290求调剂 +4 @将就将就看 2026-03-10 8/400 2026-03-14 14:23 by 千千运气
[考研] b区环境工程求调剂 +4 Maps1 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:23 by JourneyLucky
[考研] 285 求调剂 资源与环境 一志愿北京化工大学 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中科院，化学方向，295求调剂 +4 一氧二氮 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:35 by JourneyLucky
[考研] 336求调剂 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 求材料调剂 +5 隔壁陈先生 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:03 by 星空星月
[考研] 0703化学一志愿211 总分320求调剂 +5 玛卡巴卡啊哈 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:40 by JourneyLucky
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 一志愿211化学学硕310分求调剂 +8 努力奋斗112 2026-03-12 9/450 2026-03-13 15:41 by JourneyLucky
[考研] 328化工专硕求调剂 +4 。，。，。，。i 2026-03-12 4/200 2026-03-13 14:44 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
[考研] 一志愿河海大学085900土木水利专硕279求调剂不挑专业 +4 SunWwWwWw 2026-03-10 8/400 2026-03-13 02:23 by SunWwWwWw
[考研] 0703化学调剂 +3 三dd. 2026-03-10 3/150 2026-03-10 15:45 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭