应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 过带his标签的蛋白时镍柱上样后颜色变棕色是怎么回事
181/2返回列表12下一页
查看: 7358  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wight3

铜虫 (初入文坛)

[求助] 过带his标签的蛋白时镍柱上样后颜色变棕色是怎么回事 已有1人参与

过带his标签的蛋白时镍柱上样后颜色变棕色是怎么回事
柱子的颜色如下面附图
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-10-22 12:05:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

陇西才神

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wizardfan: 金币+5, 首贴奖励，以后多发帖交流 2012-11-28 07:07:45
你给的图片貌似是一根分子筛，你所谓的变成棕色是在Ni亲和柱上还是在分子筛上才变成棕色？如果是Ni亲和beads呈棕色，按我的经验，应该是你buffer中含有DTT，b-ME等还原剂，将二价Ni离子还原所致。如果是在分子筛上变色，应该是你的样品中有显色杂质，至于你的蛋白是黄色，首先考虑一下是不是结合核酸，这是最可能的因素。另外，我并不觉得蛋白结合色素分子跟发好文章有啥联系。
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2012-11-28 03:55:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

应该是样品本身所带颜色造成的
赞一下 回复此楼
2楼2011-10-22 12:20:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流！ 2011-10-22 18:43:37
图怎么这么难看？
怎么看都不像是柱子？

确定不是被氧化啥的，确定能重复出来，那你就发了。。。
有的蛋白表达出来是带着一个色素小分子的，如果真是酱紫，等着发好文章吧
赞一下(1人) 回复此楼
小木虫之有关部门负责人
3楼2011-10-22 12:21:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xhjggl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-10-24 11:48:07
裂解液中含有DTT等还原试剂，导致NI被还原
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-10-22 12:21:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

li1977li

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by scelab at 2011-10-22 12:21:17:
图怎么这么难看？
怎么看都不像是柱子？

确定不是被氧化啥的，确定能重复出来，那你就发了。。。
有的蛋白表达出来是带着一个色素小分子的，如果真是酱紫，等着发好文章吧

我表达了一个蛋白也是带颜色，是黄色的，请问这也能发好文章？望赐教。谢谢！
赞一下 回复此楼
5楼2011-10-22 15:29:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by li1977li at 2011-10-22 15:29:03:
我表达了一个蛋白也是带颜色，是黄色的，请问这也能发好文章？望赐教。谢谢！

我是猜着玩的
黄色的很常见，黄素蛋白嘛
关键是蛋白的功能了~~~没人报道过的酶促反应，应该可以发到4分左右的杂志
还有一点，运气成分啊，如果你做的相当不错，jbc都是有可能的
赞一下 回复此楼
小木虫之有关部门负责人
6楼2011-10-22 16:04:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wight3

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by doublehelix at 2011-10-22 12:20:33:
应该是样品本身所带颜色造成的

样品本身是没有颜色的，上样前也已经经过G25除盐了的，而且最终用500mM咪唑能够还原柱子颜色
赞一下 回复此楼
7楼2011-10-23 19:18:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wight3

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xhjggl at 2011-10-22 12:21:59:
裂解液中含有DTT等还原试剂，导致NI被还原

上样前也已经经过G25除盐了的，而且最终用500mM咪唑能够还原柱子颜色
赞一下 回复此楼
8楼2011-10-23 19:19:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wight3

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by scelab at 2011-10-22 12:21:17:
图怎么这么难看？
怎么看都不像是柱子？

确定不是被氧化啥的，确定能重复出来，那你就发了。。。
有的蛋白表达出来是带着一个色素小分子的，如果真是酱紫，等着发好文章吧

后面设备比较多，照的图比较大，就只截了下柱子的中间部分，这个样品是已经经过酶切了的，500咪唑也能够还原柱子颜色，明天再重复一次，看看是不是还会变颜色
赞一下 回复此楼
9楼2011-10-23 19:23:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dnaxxx

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
里面不会有还原剂吧，DTT或者巯基乙醇什么的。不过看楼主的回答不像是有这些杂质，那我觉得很有可能这个蛋白本身具有还原作用，不会是电子传递链的关键蛋白或者是什么还原酶吧？但是洗脱之后又能复原，不太明白。坐等高人解答。
赞一下 回复此楼
10楼2011-12-26 07:25:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wight3 的主题更新
181/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 娱乐 +3 Tide man 2026-08-03 3/150 2026-08-04 09:58 by gltch
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 f1dmPx051StA 2026-08-03 7/350 2026-08-04 09:31 by v1TJC4qJauAB
[博后之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 5/250 2026-08-04 09:27 by v1TJC4qJauAB
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 10/500 2026-08-04 09:26 by v1TJC4qJauAB
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 9/450 2026-08-04 09:17 by v1TJC4qJauAB
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 10/500 2026-08-04 09:15 by v1TJC4qJauAB
[基金申请] 系统今天又提示维护了，估计离放榜不远了 +12 winnerche 2026-07-29 16/800 2026-08-04 08:18 by Equinoxhua
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 10/500 2026-08-04 08:05 by 88817753
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 9/450 2026-08-04 07:37 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 13/650 2026-08-04 07:30 by k7OM8YghWbkC
[教师之家] 基础研究怎么拉横向，学校到款任务越来越多，难以完成 拉横向，都有哪些途径啊 +9 锦衣卫寒战 2026-07-28 13/650 2026-08-04 07:21 by Ermito
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 6/300 2026-08-04 06:10 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 6/300 2026-08-04 04:47 by k7OM8YghWbkC
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 03:21 by k7OM8YghWbkC
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
[高分子] UV压敏胶开发 +3 ichall 2026-07-30 5/250 2026-08-03 14:40 by Sunrisepay
[基金申请] 微信指数没变化，科研之友没阅读 +15 wangze12014 2026-07-28 19/950 2026-08-02 20:05 by 蔡棒棒菂
[考博] 2027年申博 50+3 射雕英雄胜 2026-07-30 3/150 2026-08-02 09:36 by lfy8008
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液，是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭