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zx1984

木虫 (正式写手)

[求助] 蛋白纯化

纯化蛋白时，洗脱液的PH值应该怎么选择？跟等电点像比
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1楼 2012-03-19 20:48:02
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zx1984: 金币+3, ★有帮助 2012-03-20 12:26:46
我真不知道怎么回答你啊，你用的纯化方法是什么啊，看你说的应该是离子交换吧，阳离子交换的话比等电点大1，阴离子交换的话比等电点小1个ph
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2楼2012-03-19 21:17:50
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不管选多少，只要不选等电点就行
至于选多少，要根据你的等电点，选择离子交换柱，再选择ph
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3楼2012-03-20 05:46:29
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你用的什么纯化方法啊？
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4楼2012-03-20 09:49:57
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zx1984

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lihuan0525 at 2012-03-19 21:17:50:
我真不知道怎么回答你啊，你用的纯化方法是什么啊，看你说的应该是离子交换吧，阳离子交换的话比等电点大1，阴离子交换的话比等电点小1个ph

我用的是镍柱与His tag的。
谢谢
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5楼2012-03-20 12:25:42
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zx1984

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by whb21 at 2012-03-20 09:49:57:
你用的什么纯化方法啊？

镍与His tag亲和层析
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6楼2012-03-20 12:30:07
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yinxiang_1

铜虫 (初入文坛)
如果是NI-NTA的话，看你是nature还是Denature下纯化，前者一般用咪唑梯度洗脱Ph7.4或者8.0可微调。后者，PH8，平衡，6。3洗脱杂蛋白，4.5洗脱HIs
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7楼2012-03-20 15:00:13
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zx1984

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yinxiang_1 at 2012-03-20 15:00:13:
如果是NI-NTA的话，看你是nature还是Denature下纯化，前者一般用咪唑梯度洗脱Ph7.4或者8.0可微调。后者，PH8，平衡，6。3洗脱杂蛋白，4.5洗脱HIs

谢谢
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8楼2012-03-21 08:38:11
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