[求助] 蛋白纯化

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1楼2012-03-19 20:48:02

lihuan0525

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zx1984: 金币+3, ★有帮助 2012-03-20 12:26:46

我真不知道怎么回答你啊，你用的纯化方法是什么啊，看你说的应该是离子交换吧，阳离子交换的话比等电点大1，阴离子交换的话比等电点小1个ph

赞一下(1人)

2楼2012-03-19 21:17:50

lzgxgz

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不管选多少，只要不选等电点就行
至于选多少，要根据你的等电点，选择离子交换柱，再选择ph

3楼2012-03-20 05:46:29

whb21

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你用的什么纯化方法啊？

4楼2012-03-20 09:49:57

zx1984

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2楼: Originally posted by lihuan0525 at 2012-03-19 21:17:50:
我真不知道怎么回答你啊，你用的纯化方法是什么啊，看你说的应该是离子交换吧，阳离子交换的话比等电点大1，阴离子交换的话比等电点小1个ph

我用的是镍柱与His tag的。
谢谢

5楼2012-03-20 12:25:42

zx1984

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4楼: Originally posted by whb21 at 2012-03-20 09:49:57:
你用的什么纯化方法啊？

镍与His tag亲和层析

6楼2012-03-20 12:30:07

yinxiang_1

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如果是NI-NTA的话，看你是nature还是Denature下纯化，前者一般用咪唑梯度洗脱Ph7.4或者8.0可微调。后者，PH8，平衡，6。3洗脱杂蛋白，4.5洗脱HIs

7楼2012-03-20 15:00:13

zx1984

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7楼: Originally posted by yinxiang_1 at 2012-03-20 15:00:13:
如果是NI-NTA的话，看你是nature还是Denature下纯化，前者一般用咪唑梯度洗脱Ph7.4或者8.0可微调。后者，PH8，平衡，6。3洗脱杂蛋白，4.5洗脱HIs

谢谢

8楼2012-03-21 08:38:11