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wight3

铜虫 (初入文坛)

[求助] 过带his标签的蛋白时镍柱上样后颜色变棕色是怎么回事 已有1人参与

过带his标签的蛋白时镍柱上样后颜色变棕色是怎么回事
柱子的颜色如下面附图
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陇西才神

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wizardfan: 金币+5, 首贴奖励,以后多发帖交流 2012-11-28 07:07:45
你给的图片貌似是一根分子筛,你所谓的变成棕色是在Ni亲和柱上还是在分子筛上才变成棕色?如果是Ni亲和beads呈棕色,按我的经验,应该是你buffer中含有DTT,b-ME等还原剂,将二价Ni离子还原所致。如果是在分子筛上变色,应该是你的样品中有显色杂质,至于你的蛋白是黄色,首先考虑一下是不是结合核酸,这是最可能的因素。另外,我并不觉得蛋白结合色素分子跟发好文章有啥联系。
16楼2012-11-28 03:55:46
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doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

应该是样品本身所带颜色造成的
2楼2011-10-22 12:20:33
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流! 2011-10-22 18:43:37
图怎么这么难看?
怎么看都不像是柱子?

确定不是被氧化啥的,确定能重复出来,那你就发了。。。
有的蛋白表达出来是带着一个色素小分子的,如果真是酱紫,等着发好文章吧
小木虫之有关部门负责人
3楼2011-10-22 12:21:17
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xhjggl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-10-24 11:48:07
裂解液中含有DTT等还原试剂,导致NI被还原
4楼2011-10-22 12:21:59
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