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wight3

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 过带his标签的蛋白时镍柱上样后颜色变棕色是怎么回事已有1人参与

过带his标签的蛋白时镍柱上样后颜色变棕色是怎么回事
柱子的颜色如下面附图

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1楼 2011-10-22 12:05:09

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陇西才神

新虫 (初入文坛)

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专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wizardfan: 金币+5, 首贴奖励，以后多发帖交流 2012-11-28 07:07:45

你给的图片貌似是一根分子筛，你所谓的变成棕色是在Ni亲和柱上还是在分子筛上才变成棕色？如果是Ni亲和beads呈棕色，按我的经验，应该是你buffer中含有DTT，b-ME等还原剂，将二价Ni离子还原所致。如果是在分子筛上变色，应该是你的样品中有显色杂质，至于你的蛋白是黄色，首先考虑一下是不是结合核酸，这是最可能的因素。另外，我并不觉得蛋白结合色素分子跟发好文章有啥联系。