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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 怎样把strep标签加到重组蛋白的C端
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microz

新虫 (初入文坛)

[求助] 怎样把strep标签加到重组蛋白的C端

使用pask-IBA5plus质粒
http://www.iba-go.com/downloads/pdf/2-1404-000pASK-IBA5plus.pdf

请问怎么把strep标签加入到重组蛋白的C端啊，需要注意什么问题?
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1楼2012-03-19 07:03:33
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 专家考核 2012-03-19 10:19:44
microz: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-03-21 00:08:12
看了图谱，这是N端加strep标签的载体。
但是你实在是要把strep标签加入到重组蛋白的C端也是可以的，用XbaI和NheI酶切位点，注意不要破坏启动子、RBS位点，保存它们的完整性和正确的位置和距离。
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2楼2012-03-19 09:20:45
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microz

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lxj341401 at 2012-03-19 09:20:45:
看了图谱，这是N端加strep标签的载体。
但是你实在是要把strep标签加入到重组蛋白的C端也是可以的，用XbaI和NheI酶切位点，注意不要破坏启动子、RBS位点，保存它们的完整性和正确的位置和距离。

谢谢！

strep tag 保留ATG，对蛋白表达没有影响吧？
这两个酶切位点您是怎么找到的？
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3楼2012-03-20 19:13:29
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by microz at 2012-03-20 19:13:29:
谢谢！

strep tag 保留ATG，对蛋白表达没有影响吧？
这两个酶切位点您是怎么找到的？

就你给的链接里面看到的呀。strep tag 保留ATG应该没影响。
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4楼2012-03-20 21:00:10
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