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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】重组蛋白融合标签的选择
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yangjun9121

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】重组蛋白融合标签的选择 已有6人参与

各位虫友：
　　　　如果做外源基因在大肠杆菌中的表达，加上一个标签对表达后的重组蛋白有什么影响吗？如活性，三维结构之类．如果我想增加重组蛋白的可溶表达，应该加一个什么样的标签呢？还请各位不吝指点，非常感谢！！！
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1楼 2011-01-06 16:40:36
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

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优秀版主
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+3):鼓励积极参与~~~ 2011-01-06 17:48:34
影响是百分百有的，就看影响大小了，这个主要看运气

要不为什么重组蛋白这么贵啊，就是有些是经过点突变的，这个taq是最佳例子

哪个公司整出的好的点突变就可以申请专利发大财了

重组担保基本都是带标签的原核表达，想昆虫或CHO等细胞用作表达的只占很少部分

虽然标签影响结构和活性，但是利于纯化分离和大规模生产

置于可不可溶，八成看你的蛋白序列
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2楼2011-01-06 16:45:02
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yangjun9121

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-01-06 16:45:02:
影响是百分百有的，就看影响大小了，这个主要看运气

要不为什么重组蛋白这么贵啊，就是有些是经过点突变的，这个taq是最佳例子

哪个公司整出的好的点突变就可以申请专利发大财了

重组担保基本都是带标签 ...

恩，非常感谢您的解答，我的这段序列之前在BL21和ROSETTA中表达过了，可溶表达还是挺多的，如果要进一步增加它的可溶表达是否可以考虑加标签呢？我不做蛋白纯化，我只是想提高表达量从而提高目标产物的量．．谢谢
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3楼2011-01-06 16:52:59
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xuguanghai

木虫 (职业作家)
用HIS或者GST试一试吧
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4楼2011-01-06 17:15:20
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laoshu16

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
MBP对蛋白表达可溶性有好处的
赞一下(1人) 回复此楼
在幻变的生命中，岁月原是那最大的小偷。。。
5楼2011-01-07 10:36:18
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mlw8486

银虫 (正式写手)
GST和MBP都对可溶表达有帮助
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justsoso......
6楼2011-01-08 13:40:20
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flownaway

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以选用His或Flag标签，都只有不到10个氨基酸，加在蛋白N或C末端都可以尝试一下
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7楼2012-06-06 11:40:49
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