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yangjun9121

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】重组蛋白融合标签的选择 已有6人参与

各位虫友:
    如果做外源基因在大肠杆菌中的表达,加上一个标签对表达后的重组蛋白有什么影响吗?如活性,三维结构之类.如果我想增加重组蛋白的可溶表达,应该加一个什么样的标签呢?还请各位不吝指点,非常感谢!!!
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silicare

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+3):鼓励积极参与~~~ 2011-01-06 17:48:34
影响是百分百有的,就看影响大小了,这个主要看运气

要不为什么重组蛋白这么贵啊,就是有些是经过点突变的,这个taq是最佳例子

哪个公司整出的好的点突变就可以申请专利发大财了

重组担保基本都是带标签的原核表达,想昆虫或CHO等细胞用作表达的只占很少部分

虽然标签影响结构和活性,但是利于纯化分离和大规模生产

置于可不可溶,八成看你的蛋白序列
2楼2011-01-06 16:45:02
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yangjun9121

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-01-06 16:45:02:
影响是百分百有的,就看影响大小了,这个主要看运气

要不为什么重组蛋白这么贵啊,就是有些是经过点突变的,这个taq是最佳例子

哪个公司整出的好的点突变就可以申请专利发大财了

重组担保基本都是带标签 ...

恩,非常感谢您的解答,我的这段序列之前在BL21和ROSETTA中表达过了,可溶表达还是挺多的,如果要进一步增加它的可溶表达是否可以考虑加标签呢?我不做蛋白纯化,我只是想提高表达量从而提高目标产物的量..谢谢
3楼2011-01-06 16:52:59
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xuguanghai

木虫 (职业作家)

用HIS或者GST试一试吧
4楼2011-01-06 17:15:20
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laoshu16

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
MBP对蛋白表达可溶性有好处的
在幻变的生命中,岁月原是那最大的小偷。。。
5楼2011-01-07 10:36:18
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mlw8486

银虫 (正式写手)

GST和MBP都对可溶表达有帮助
justsoso......
6楼2011-01-08 13:40:20
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flownaway

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以选用His或Flag标签,都只有不到10个氨基酸,加在蛋白N或C末端都可以尝试一下
7楼2012-06-06 11:40:49
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