应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 过带his标签的蛋白时镍柱上样后颜色变棕色是怎么回事
181/2返回列表12下一页
查看: 7580  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wight3

铜虫 (初入文坛)

[求助] 过带his标签的蛋白时镍柱上样后颜色变棕色是怎么回事 已有1人参与

过带his标签的蛋白时镍柱上样后颜色变棕色是怎么回事
柱子的颜色如下面附图
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-10-22 12:05:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

陇西才神

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wizardfan: 金币+5, 首贴奖励，以后多发帖交流 2012-11-28 07:07:45
你给的图片貌似是一根分子筛，你所谓的变成棕色是在Ni亲和柱上还是在分子筛上才变成棕色？如果是Ni亲和beads呈棕色，按我的经验，应该是你buffer中含有DTT，b-ME等还原剂，将二价Ni离子还原所致。如果是在分子筛上变色，应该是你的样品中有显色杂质，至于你的蛋白是黄色，首先考虑一下是不是结合核酸，这是最可能的因素。另外，我并不觉得蛋白结合色素分子跟发好文章有啥联系。
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2012-11-28 03:55:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

应该是样品本身所带颜色造成的
赞一下 回复此楼
2楼2011-10-22 12:20:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流！ 2011-10-22 18:43:37
图怎么这么难看？
怎么看都不像是柱子？

确定不是被氧化啥的，确定能重复出来，那你就发了。。。
有的蛋白表达出来是带着一个色素小分子的，如果真是酱紫，等着发好文章吧
赞一下(1人) 回复此楼
小木虫之有关部门负责人
3楼2011-10-22 12:21:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xhjggl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-10-24 11:48:07
裂解液中含有DTT等还原试剂，导致NI被还原
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-10-22 12:21:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

li1977li

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by scelab at 2011-10-22 12:21:17:
图怎么这么难看？
怎么看都不像是柱子？

确定不是被氧化啥的，确定能重复出来，那你就发了。。。
有的蛋白表达出来是带着一个色素小分子的，如果真是酱紫，等着发好文章吧

我表达了一个蛋白也是带颜色，是黄色的，请问这也能发好文章？望赐教。谢谢！
赞一下 回复此楼
5楼2011-10-22 15:29:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by li1977li at 2011-10-22 15:29:03:
我表达了一个蛋白也是带颜色，是黄色的，请问这也能发好文章？望赐教。谢谢！

我是猜着玩的
黄色的很常见，黄素蛋白嘛
关键是蛋白的功能了~~~没人报道过的酶促反应，应该可以发到4分左右的杂志
还有一点，运气成分啊，如果你做的相当不错，jbc都是有可能的
赞一下 回复此楼
小木虫之有关部门负责人
6楼2011-10-22 16:04:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wight3

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by doublehelix at 2011-10-22 12:20:33:
应该是样品本身所带颜色造成的

样品本身是没有颜色的，上样前也已经经过G25除盐了的，而且最终用500mM咪唑能够还原柱子颜色
赞一下 回复此楼
7楼2011-10-23 19:18:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wight3

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xhjggl at 2011-10-22 12:21:59:
裂解液中含有DTT等还原试剂，导致NI被还原

上样前也已经经过G25除盐了的，而且最终用500mM咪唑能够还原柱子颜色
赞一下 回复此楼
8楼2011-10-23 19:19:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wight3

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by scelab at 2011-10-22 12:21:17:
图怎么这么难看？
怎么看都不像是柱子？

确定不是被氧化啥的，确定能重复出来，那你就发了。。。
有的蛋白表达出来是带着一个色素小分子的，如果真是酱紫，等着发好文章吧

后面设备比较多，照的图比较大，就只截了下柱子的中间部分，这个样品是已经经过酶切了的，500咪唑也能够还原柱子颜色，明天再重复一次，看看是不是还会变颜色
赞一下 回复此楼
9楼2011-10-23 19:23:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dnaxxx

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
里面不会有还原剂吧，DTT或者巯基乙醇什么的。不过看楼主的回答不像是有这些杂质，那我觉得很有可能这个蛋白本身具有还原作用，不会是电子传递链的关键蛋白或者是什么还原酶吧？但是洗脱之后又能复原，不太明白。坐等高人解答。
赞一下 回复此楼
10楼2011-12-26 07:25:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wight3 的主题更新
181/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:12 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:00 by Aj1rhIDL5ixY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:57 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:48 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:45 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:37 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:21 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:13 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:01 by Aj1rhIDL5ixY
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:00 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 14:57 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-14 12:35 by 40ms4Wlo4umh
[基金申请] 求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？ +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 10:11 by 23jxep3nCNZb
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭