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hraikeyan

金虫 (小有名气)

[求助] 有关嗜热蛋白纯化的问题

各位虫友:我现在在做蛋白纯化。
先介绍一下我的蛋白:我做的蛋白是一种嗜热蛋白,在100℃下还能保持很好的活性。所以就想通过煮蛋白的方式,使杂蛋白变性沉淀下去,而上清中只保留 我自己的目标蛋白。但是现在我不管怎么煮在距离目标蛋白很近的位置总有杂蛋白存在,怎么煮都煮不干净。我的宿主菌是大肠杆菌(rossetta),按说大肠杆菌是不会有嗜热的蛋白存在的,怎么会除不干净呢?有用过这种纯化蛋白的虫友 们能否借鉴一些纯化经验啊!小虫将不甚感激!
下面附纯化蛋白电泳图一张:
有关嗜热蛋白纯化的问题
纯化蛋白.jpg
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nothing isimpossible
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hraikeyan(myprayer代发): 金币+1, 鼓励应助,热心的顾问分子生物期待更多精彩 2013-07-27 23:58:50
hraikeyan: 金币+3, ★★★很有帮助, 我的蛋白上没有标签,因为它是嗜热的想着煮一下就纯化干净了,所以没有加标签。我之前也跑过空大肠的,空大肠也是有这条条带的。 2013-07-28 09:14:53

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
hraikeyan(gyesang代发): 金币+2, 鼓励应助! 2013-07-28 17:15:52

克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hraikeyan: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-07-29 09:38:55
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