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hecuie1118铁虫 (初入文坛)
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PCR电泳总是出现杂带，该怎么处理？
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最近在做铜绿假单胞菌的oprD基因的分析，扩增之后跑电泳出现了目的条带，但是总是会出现其他的条带，少的有一条，多的有好几条，改了几次退火温度也不行，用降落PCR做65-55℃也不行，反而杂带更多了，图如下，请教各位大侠该怎么办呢，要换引物吗？ 1、2图最左侧为Marker，从下到上为2000,1000,750,500,250,200,100bp。目的基因为1332bp，往右依次是PAO1，ATCC27853两个质控菌株，然后待测的菌株。总是出现杂带。 3图为不同的退火温度，59度。60度及62度。 参数为 98℃ 5min 95℃ 40S 58℃ 40s 30个循环 72℃ 90s 72℃ 10min  1.jpg  2.jpg  3.jpg |
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