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额敏的雪

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[求助] pMD18-T载体不需要酶切吗已有1人参与

为什么将带有相应酶切位点的基因连入pMD18-T载体时不需要对载体进行酶切？

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1楼2013-01-28 13:07:02

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pandezhuo

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【答案】应助回帖

引用回帖:

9楼: Originally posted by 左手abby at 2017-09-24 22:54:57
我最近在做加A，但是总是加不上，请问你做加A都是怎么的
...

如果你直接用高保真酶PCR的话，首先切胶回收纯化OCR产物。接着有种简单的做法加A，反应体系为PCR纯化物25微升，蓝酶Trans Direct PCR SuperMix 25微升，反应程序为72℃，30分钟。然后纯化PCR产物，进行下一步pMD18-T连接

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11楼2017-10-16 13:46:38

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