应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pMD18-T载体不需要酶切吗
52/1返回列表
查看: 6799  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

额敏的雪

金虫 (著名写手)

[求助] pMD18-T载体不需要酶切吗 已有1人参与

为什么将带有相应酶切位点的基因连入pMD18-T载体时不需要对载体进行酶切？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-01-28 13:07:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pandezhuo

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 左手abby at 2017-09-24 22:54:57
我最近在做加A，但是总是加不上，请问你做加A都是怎么的
...

如果你直接用高保真酶PCR的话，首先切胶回收纯化OCR产物。接着有种简单的做法加A，反应体系为PCR纯化物25微升，蓝酶Trans Direct PCR SuperMix 25微升，反应程序为72℃，30分钟。然后纯化PCR产物，进行下一步pMD18-T连接

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
11楼2017-10-16 13:46:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

yesali

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
额敏的雪: 金币+2 2013-01-28 15:45:44
一般的taq酶做PCR时，PCR产物末端有突出的碱基A，pMD18-T载体有突出的碱基T，AT是互补的，故可以连接上
赞一下 回复此楼
2楼2013-01-28 13:17:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

武京帅

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用的是TA克隆的方法  如楼上所说 不用再切了就
赞一下 回复此楼
To be all you what you can be!
3楼2013-01-28 15:09:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
嗯，楼上两位说的很正确，附和下！
赞一下 回复此楼
生物化学与分子生物学
4楼2013-01-28 17:23:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭