| 查看: 3940 | 回复: 14 | |||
gloryping铁杆木虫 (小有名气)
|
[求助]
PCR扩不出目的基因
|
||
| 从细胞中抽提RNA，然后反转录为cDNA，在做定量PCR前先做普通PCR，可是扩了好几次都没扩出来，跟文献用的是同样的引物，PCR反应条件也是参考文献中的，使用了genomic DNA 作为内参，但最终是只有引物二聚体，扩不出目的条带。不知RNA及后续cDNA质量会不会影响PCR，本人是新手，求指教！ |
回复此楼» 猜你喜欢
今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果
已经有20人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有6人回复
-
科研孤儿太难了
已经有18人回复
-
建议基金发布提前给出明确的时间点
已经有12人回复
-
看来今天不会放榜了？
已经有11人回复
-
时间戳又变了
已经有19人回复
-
filecode，4个jtjc了
已经有14人回复
-
让我中一个面上吧！
已经有13人回复
-
人气不行了
已经有7人回复
-
感觉是下周放榜了
已经有12人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助内参基因扩不出来的问题？
已经有7人回复
- 我现在P基因P不出来，基因的RNA6000多，CDS2000左右，为啥P不出？
已经有4人回复
- 反转录PCR一直P不出来，求助
已经有6人回复
- 为什么同样的PCR条件结果重复不出来呢，P出来一次之后就P不出来了
已经有22人回复
- 反转录的cDNA没问题，但是实时定量PCR却不行。内参扩不出来啊。
已经有8人回复
- 已经得到目的基因的全长，现在要PCR将目的基因全长P出来，如何设计引物？谢谢
已经有12人回复
- PCR引物必须与目的基因片段的一小段序列互补吗？急！！！
已经有9人回复
- 融合PCR最后一步做不出来，求救！！！
已经有23人回复
- 欲PCR扩增4200bp左右的目的片段，一直得不到目的条带，求高人指教！
已经有25人回复
- PCR扩增不出目的条带
已经有12人回复
- 荧光定量PCR设计了三对引物了，都扩增不出来，郁闷啊
已经有4人回复
- 反转录后用cDNA做模板扩不出目的基因怎么办？？？
已经有6人回复
- PCR不出目的条带的原因
已经有12人回复
- 急急急！诡异基因PCR扩不出来。。。
已经有6人回复
- PCR空白跑出了与目的基因一样的一条浅带
已经有16人回复
- RT-PCR的cDNA不能扩增出目的条带，只有内参基因能扩增出来
已经有14人回复
- PCR退火温度态度会导致扩增不出目的条带么？
已经有4人回复
- pcr一直不出结果，可以从哪些方面调整
已经有13人回复
- PCR一直扩不出目的条带
已经有10人回复
- 根据已知序列，从相同菌种(菌株编号不同)中能PCR出目的基因吗？
已经有6人回复
- cDNA做普通PCR扩不出条带来
已经有13人回复
- 两次QPCR前后目的基因的CT值不一样
已经有6人回复
- 求助！PCR扩增不出全长DNA序列怎么办？
已经有24人回复
- 【求助/交流】菌落PCR为什么每次都扩不出来呢？
已经有9人回复
- 【求助/交流】基因组PCR老P不出目的带
已经有39人回复
- 怎么扩不出来
已经有7人回复
【答案】应助回帖
★ ★
gloryping(金币+2): 2011-09-18 17:26:12
lstt09nk(金币+2): 热心虫友 2011-10-11 14:33:02
gloryping(金币+2): 2011-09-18 17:26:12
lstt09nk(金币+2): 热心虫友 2011-10-11 14:33:02
| 做不出来有很多原因的，但鉴于你是新手，我个人觉得是不是有些东西加多了，比如酶一般25u的体系加0.5就很多了，但如果你把枪头完全插进去，壁上沾的就不仅仅0.5了，慢慢来，多试几遍，一定要小心谨慎。生物114 http://www.shengwu114.com/ |
2楼2011-09-18 17:24:40
hgq115
金虫 (小有名气)
- BioEPI: 1
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1213.7
- 散金: 20
- 红花: 1
- 帖子: 274
- 在线: 86.1小时
- 虫号: 741583
- 注册: 2009-04-06
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
4楼2011-09-19 09:51:51
gloryping
铁杆木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 5158.1
- 散金: 8
- 红花: 2
- 帖子: 196
- 在线: 435.9小时
- 虫号: 916299
- 注册: 2009-11-29
- 专业: 电化学
11楼2011-10-11 11:06:05
gloryping
铁杆木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 5158.1
- 散金: 8
- 红花: 2
- 帖子: 196
- 在线: 435.9小时
- 虫号: 916299
- 注册: 2009-11-29
- 专业: 电化学
3楼2011-09-18 17:26:57
5楼2011-09-19 11:09:38
anhong1122
金虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 823.5
- 帖子: 46
- 在线: 13.2小时
- 虫号: 266932
- 注册: 2006-07-22
- 专业: 免疫学研究新技术与新方法
6楼2011-09-19 11:26:21
gloryping
铁杆木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 5158.1
- 散金: 8
- 红花: 2
- 帖子: 196
- 在线: 435.9小时
- 虫号: 916299
- 注册: 2009-11-29
- 专业: 电化学
7楼2011-09-19 12:39:07
gloryping
铁杆木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 5158.1
- 散金: 8
- 红花: 2
- 帖子: 196
- 在线: 435.9小时
- 虫号: 916299
- 注册: 2009-11-29
- 专业: 电化学
8楼2011-09-19 12:39:55
gloryping
铁杆木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 5158.1
- 散金: 8
- 红花: 2
- 帖子: 196
- 在线: 435.9小时
- 虫号: 916299
- 注册: 2009-11-29
- 专业: 电化学
9楼2011-09-19 12:40:43
10楼2011-10-11 10:51:28
40