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gloryping

铁杆木虫 (小有名气)

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[求助] PCR扩不出目的基因

从细胞中抽提RNA，然后反转录为cDNA，在做定量PCR前先做普通PCR，可是扩了好几次都没扩出来，跟文献用的是同样的引物，PCR反应条件也是参考文献中的，使用了genomic DNA 作为内参，但最终是只有引物二聚体，扩不出目的条带。不知RNA及后续cDNA质量会不会影响PCR，本人是新手，求指教！

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怎么扩不出来已经有7人回复

1楼 2011-09-18 17:08:55

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gloryping

铁杆木虫 (小有名气)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by 依依米米 at 2011-09-18 17:24:40:
做不出来有很多原因的，但鉴于你是新手，我个人觉得是不是有些东西加多了，比如酶一般25u的体系加0.5就很多了，但如果你把枪头完全插进去，壁上沾的就不仅仅0.5了，慢慢来，多试几遍，一定要小心谨慎。生物114 [u ...

谢谢解答。酶加多了也会扩不出来吗？