应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR扩不出目的基因
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 3531  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

gloryping

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] PCR扩不出目的基因

从细胞中抽提RNA，然后反转录为cDNA，在做定量PCR前先做普通PCR，可是扩了好几次都没扩出来，跟文献用的是同样的引物，PCR反应条件也是参考文献中的，使用了genomic DNA 作为内参，但最终是只有引物二聚体，扩不出目的条带。不知RNA及后续cDNA质量会不会影响PCR，本人是新手，求指教！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-09-18 17:08:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gloryping

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 依依米米 at 2011-09-18 17:24:40:
做不出来有很多原因的，但鉴于你是新手，我个人觉得是不是有些东西加多了，比如酶一般25u的体系加0.5就很多了，但如果你把枪头完全插进去，壁上沾的就不仅仅0.5了，慢慢来，多试几遍，一定要小心谨慎。生物114 [u ...

谢谢解答。酶加多了也会扩不出来吗？
赞一下 回复此楼
3楼2011-09-18 17:26:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

依依米米

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gloryping(金币+2): 2011-09-18 17:26:12
lstt09nk(金币+2): 热心虫友 2011-10-11 14:33:02
做不出来有很多原因的，但鉴于你是新手，我个人觉得是不是有些东西加多了，比如酶一般25u的体系加0.5就很多了，但如果你把枪头完全插进去，壁上沾的就不仅仅0.5了，慢慢来，多试几遍，一定要小心谨慎。生物114 http://www.shengwu114.com/
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-09-18 17:24:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hgq115

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

gloryping(金币+2): 2011-09-19 12:36:22
你参照的文献是什么杂志的，还是建议自己设计一次引物，因为很多中文文献上的引物，直接用来做都很难做出来，我曾经就出过这样的问题。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-09-19 09:51:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清风寨

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

gloryping(金币+2): 2011-09-19 12:39:21
建议自己设计引物 不要所有都参照文献 退火温度可以设置梯度试一下  延伸时间要充足 等等 有时候自己做PCR时同样条件就有时能出来有时出不来 很是郁闷
赞一下 回复此楼
冷风过心变热
5楼2011-09-19 11:09:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0817化工学硕调剂 +4 努力上岸中！ 2026-03-31 4/200 2026-03-31 09:02 by 功夫疯狂
[考研] 335求调剂 +3 321* 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:00 by 功夫疯狂
[考研] 0703化学 +15 妮妮ninicgb 2026-03-27 15/750 2026-03-31 08:28 by yanflower7133
[考研] 08工科求调剂286 +5 tgs_001 2026-03-28 5/250 2026-03-31 08:18 by 一只好果子?
[考研] 285求调剂 +6 AZMK 2026-03-30 9/450 2026-03-31 08:01 by jp9609
[考研] 085404 22408 315分 +3 zhuangyan123 2026-03-31 3/150 2026-03-31 07:57 by 机械调剂-北石化
[考研] 生物学学硕，一志愿湖南大学，初试成绩338 +7 YYYYYNNNNN 2026-03-26 9/450 2026-03-30 20:29 by YYYYYNNNNN
[考研] 309求调剂 +15 谁不是少年 2026-03-29 15/750 2026-03-30 19:28 by 2026材料调剂
[考研] 322求调剂 +10 宋明欣 2026-03-27 10/500 2026-03-30 18:47 by 544594351
[考研] 310求调剂 +10 争取九点睡 2026-03-30 10/500 2026-03-30 16:45 by ztnimte
[考研] 材料专硕调剂 +11 椰椰。 2026-03-29 11/550 2026-03-30 16:21 by wangjy2002
[考研] 环境科学与工程334分求调剂 +6 王一一依依 2026-03-30 8/400 2026-03-30 11:52 by yjolah
[考研] 394求调剂 +3 好事多磨静候佳� 2026-03-26 5/250 2026-03-28 14:24 by 唐沐儿
[考研] 070300求调剂306分 +4 26要上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-28 13:06 by 唐沐儿
[考研] 张芳铭-中国农业大学-环境工程专硕-298 +4 手机用户 2026-03-26 4/200 2026-03-28 07:17 by mmm just
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +15 荷包蛋hyj 2026-03-26 15/750 2026-03-28 04:13 by fmesaito
[考研] 331环境科学与工程求调剂 +3 熠然好运气 2026-03-27 3/150 2026-03-28 04:11 by fmesaito
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
[考研] 0856调剂 +5 求求让我有书读� 2026-03-26 6/300 2026-03-27 15:12 by caszguilin
[考研] 一志愿吉大071010，316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭