版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

gloryping

铁杆木虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 5158.1
散金: 8
红花: 2
帖子: 196
在线: 435.9小时
虫号: 916299
注册: 2009-11-29
专业: 电化学

[求助] PCR扩不出目的基因

从细胞中抽提RNA，然后反转录为cDNA，在做定量PCR前先做普通PCR，可是扩了好几次都没扩出来，跟文献用的是同样的引物，PCR反应条件也是参考文献中的，使用了genomic DNA 作为内参，但最终是只有引物二聚体，扩不出目的条带。不知RNA及后续cDNA质量会不会影响PCR，本人是新手，求指教！

» 猜你喜欢

之前让一硕士生水了7个发明专利，现在这7个获批发明专利的维护费可从哪儿支出哈？已经有5人回复
博士读完未来一定会好吗已经有29人回复
博士申请都是内定的吗？已经有5人回复
到新单位后，换了新的研究方向，没有团队，持续积累2区以上论文，能申请到面上吗已经有12人回复
投稿精细化工已经有4人回复
高职单位投计算机相关的北核或SCI四区期刊推荐，求支招！已经有4人回复
导师想让我从独立一作变成了共一第一已经有9人回复
读博已经有4人回复
JMPT 期刊投稿流程已经有4人回复
心脉受损已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

求助内参基因扩不出来的问题？已经有7人回复
我现在P基因P不出来，基因的RNA6000多，CDS2000左右，为啥P不出？已经有4人回复
反转录PCR一直P不出来，求助已经有6人回复
为什么同样的PCR条件结果重复不出来呢，P出来一次之后就P不出来了已经有22人回复
反转录的cDNA没问题，但是实时定量PCR却不行。内参扩不出来啊。已经有8人回复
已经得到目的基因的全长，现在要PCR将目的基因全长P出来，如何设计引物？谢谢已经有12人回复
PCR引物必须与目的基因片段的一小段序列互补吗？急！！！已经有9人回复
融合PCR最后一步做不出来，求救！！！已经有23人回复
欲PCR扩增4200bp左右的目的片段，一直得不到目的条带，求高人指教！已经有25人回复
PCR扩增不出目的条带已经有12人回复
荧光定量PCR设计了三对引物了，都扩增不出来，郁闷啊已经有4人回复
反转录后用cDNA做模板扩不出目的基因怎么办？？？已经有6人回复
PCR不出目的条带的原因已经有12人回复
急急急！诡异基因PCR扩不出来。。。已经有6人回复
PCR空白跑出了与目的基因一样的一条浅带已经有16人回复
RT-PCR的cDNA不能扩增出目的条带，只有内参基因能扩增出来已经有14人回复
PCR退火温度态度会导致扩增不出目的条带么？已经有4人回复
pcr一直不出结果，可以从哪些方面调整已经有13人回复
PCR一直扩不出目的条带已经有10人回复
根据已知序列，从相同菌种(菌株编号不同)中能PCR出目的基因吗？已经有6人回复
cDNA做普通PCR扩不出条带来已经有13人回复
两次QPCR前后目的基因的CT值不一样已经有6人回复
求助！PCR扩增不出全长DNA序列怎么办？已经有24人回复
【求助/交流】菌落PCR为什么每次都扩不出来呢？已经有9人回复
【求助/交流】基因组PCR老P不出目的带已经有39人回复
怎么扩不出来已经有7人回复

1楼2011-09-18 17:08:55

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

依依米米

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 16.1
帖子: 5
在线: 35分钟
虫号: 1386303
注册: 2011-09-01
专业: 植物生理与生化

【答案】应助回帖

★ ★
gloryping(金币+2): 2011-09-18 17:26:12
lstt09nk(金币+2): 热心虫友 2011-10-11 14:33:02

做不出来有很多原因的，但鉴于你是新手，我个人觉得是不是有些东西加多了，比如酶一般25u的体系加0.5就很多了，但如果你把枪头完全插进去，壁上沾的就不仅仅0.5了，慢慢来，多试几遍，一定要小心谨慎。生物114 http://www.shengwu114.com/

赞一下(2人)

2楼2011-09-18 17:24:40

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 gloryping 的主题更新