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gloryping铁杆木虫 (小有名气)
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[求助]
PCR扩不出目的基因
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| 从细胞中抽提RNA，然后反转录为cDNA，在做定量PCR前先做普通PCR，可是扩了好几次都没扩出来，跟文献用的是同样的引物，PCR反应条件也是参考文献中的，使用了genomic DNA 作为内参，但最终是只有引物二聚体，扩不出目的条带。不知RNA及后续cDNA质量会不会影响PCR，本人是新手，求指教！ |
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gloryping
铁杆木虫 (小有名气)
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11楼2011-10-11 11:06:05
【答案】应助回帖
★ ★
gloryping(金币+2): 2011-09-18 17:26:12
lstt09nk(金币+2): 热心虫友 2011-10-11 14:33:02
gloryping(金币+2): 2011-09-18 17:26:12
lstt09nk(金币+2): 热心虫友 2011-10-11 14:33:02
| 做不出来有很多原因的，但鉴于你是新手，我个人觉得是不是有些东西加多了，比如酶一般25u的体系加0.5就很多了，但如果你把枪头完全插进去，壁上沾的就不仅仅0.5了，慢慢来，多试几遍，一定要小心谨慎。生物114 http://www.shengwu114.com/ |
2楼2011-09-18 17:24:40
gloryping
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3楼2011-09-18 17:26:57
hgq115
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4楼2011-09-19 09:51:51