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1楼2015-06-29 20:08:22

hutil1543

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【答案】应助回帖

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优化提质粒的方法，去乙醇彻底点。

2楼2015-06-30 08:50:35

gstracy

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引用回帖:

2楼: Originally posted by hutil1543 at 2015-06-30 08:50:35
优化提质粒的方法，去乙醇彻底点。

用的生工小提质粒试剂盒，重提质粒也双酶切不开，用NcoI 单酶切就可以切成线性的，HindIII还是切不了。
我现在考虑三个方面：
1.HindIII 酶切位点受甲基化影响
2.菌液转接的时候被污染或者突变
3.保护碱基的问题

3楼2015-06-30 12:45:50

baishujun

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能说一下你的用量还有酶切的时间嘛？我是37摄氏度 30分钟 up to

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4楼2016-03-28 11:08:43

凯伦爱佳佳

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引用回帖:

4楼: Originally posted by baishujun at 2016-03-28 11:08:43
能说一下你的用量还有酶切的时间嘛？我是37摄氏度 30分钟 up to

我用公司返还的质粒，BamH1和EcoR1酶切4个小时，感觉还没有切开。。。

5楼2016-03-28 17:36:30