24小时热门版块排行榜    

查看: 2542  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

uniquethh

新虫 (初入文坛)

[求助] 菌液PCR为什么总是没有结果 已有6人参与

酶切后的空载质粒板一个菌都没长,实验组长了几十个菌,挑了16个单克隆出来,500ul抗性medium摇菌了1小时后,
菌液PCR体系:1ul的菌液、0.5ul质粒上的前后通用引物, 0.5的Taq酶 ,0.5dNTP , 2ul buffer   加ddw至20ul
菌液PCR条件:95度 5分钟      95度 30秒   58度 30秒  72度2分钟(目的片段是1.8kb)  72度 10分钟   12度  20分钟  
为什么跑胶没有结果,什么都没有P出来?   是不是代表是空载?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

uniquethh

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 277795 at 2015-06-02 11:58:44
一个小时也太短了啊  还有预变性可以延长时间  10分钟   使菌液中的DNA更充分的释放出来

谢谢

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2015-06-02 16:00:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第一眼看到是摇菌1小时,会不会太短?菌还没有长起来
2楼2015-06-01 16:47:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lena699

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以试试直接从单克隆直接蘸取一点菌来做菌落PCR
3楼2015-06-01 18:08:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang6871

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
直接菌落pcr,不必要菌液pcr
过于功利,浮躁,布满灰尘的心都是创新的杀手!多记,心静,多动手,贴近大自然!
4楼2015-06-01 18:13:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料求调剂 +3 .m.. 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:48 by 18337163304
[考研] 0856求调剂 +3 zhn03 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:02 by Ainin_
[考研] 机械学硕总分317求调剂!!!! +3 Acaciad 2026-03-25 3/150 2026-03-25 18:59 by 简之-
[考研] 289求调剂 +12 硕星赴 2026-03-23 12/600 2026-03-25 18:41 by Ainin_
[考研] 材料与化工328分调剂 +5 。,。,。,。i 2026-03-23 5/250 2026-03-25 18:40 by xcjcqu
[考研] 311求调剂 +4 勇敢的小吴 2026-03-20 4/200 2026-03-25 18:12 by xcjcqu
[考研] 材料277求调剂 +4 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 15:29 by fch1983
[考研] 271求调剂 +4 生如夏花… 2026-03-22 4/200 2026-03-25 11:25 by userper
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 材料292调剂 +8 橘颂思美人 2026-03-23 8/400 2026-03-24 16:33 by laoshidan
[考博] 申博26年 +4 八6八68 2026-03-19 4/200 2026-03-24 15:49 by 小Ben呵呵
[考研] 321求调剂 +4 Ymlll 2026-03-24 4/200 2026-03-24 14:44 by sprinining
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +9 材料学257求调剂 2026-03-23 10/500 2026-03-24 07:36 by wangy0907
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 一志愿070300浙大化学358分,求调剂! +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 353求调剂 +3 拉钩不许变 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:56 by JourneyLucky
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
信息提示
请填处理意见