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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 酶连时间多久合适
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yydr

新虫 (初入文坛)

[求助] 酶连时间多久合适 已有3人参与

3k片段与TAKARA T载体连接 多久后可以做转化

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2015-05-06 09:18:40
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
过夜即可

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2楼2015-05-06 09:19:30
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yydr

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuguiyan at 2015-05-06 09:19:30
过夜即可

我之前过夜一直连不上，想想是不是时间的问题？

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3楼2015-05-06 09:24:23
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yydr: 金币+1 2015-05-06 19:07:18
引用回帖:
3楼: Originally posted by yydr at 2015-05-06 09:24:23
我之前过夜一直连不上，想想是不是时间的问题？
...

肯定不是时间问题

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4楼2015-05-06 09:53:07
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zhang6871

银虫 (正式写手)
★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-06 13:04:05
3k有点大，可以16度过夜。注意摩尔比
实在还不行，可以考虑更换载体，更换连接酶
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过于功利，浮躁，布满灰尘的心都是创新的杀手!多记，心静，多动手，贴近大自然!
5楼2015-05-06 11:22:32
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yydr

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zhang6871 at 2015-05-06 11:22:32
3k有点大，可以16度过夜。注意摩尔比
实在还不行，可以考虑更换载体，更换连接酶

如果第一次回收后条带不单一又进行了第二次胶回收，这样a尾会不会都掉了然后影响酶连呢

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6楼2015-05-06 19:08:26
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zhang6871

银虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by yydr at 2015-05-06 19:08:26
如果第一次回收后条带不单一又进行了第二次胶回收，这样a尾会不会都掉了然后影响酶连呢
...

应该不会。
如果想简单推荐用平末端连接。
pEasyBlunt很好，我们现在就用这个。
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过于功利，浮躁，布满灰尘的心都是创新的杀手!多记，心静，多动手，贴近大自然!
7楼2015-05-09 10:40:41
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wshi85

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

这个与时间没太多关系，与片段的浓度有蛮大的关系的，我们用连2-3小时，效率也蛮不错的
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很久没在虫虫上漂游了，觉得回归虫虫！
8楼2015-05-09 13:57:02
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千山万水T

铜虫 (初入文坛)
我用的是20ul体系:基因片段16ul，载体1ul,Buffer2ul,T4酶1ul。

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9楼2015-05-09 16:18:06
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千山万水T

铜虫 (初入文坛)
我用的是20ul体系:基因片段16ul，载体1ul,Buffer2ul,T4酶1ul。

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10楼2015-05-09 16:18:38
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