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myeagle银虫 (小有名气)
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同尾酶酶切及连接 已有1人参与
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| 各位高手，我是做真菌的，一个敲除质粒的下游的多克隆酶切位点是Spe1和Xba1这两个同尾酶，目的片段连上去之后做菌落PCR验证片段已经连上，但是提质粒酶切总是切不开，这说明了片段的方向连反造成了新的酶切位点的产生，但是我们已经挑了100个转化子了，按道理来说连正跟反的几率是1:1，但是总该有方向正确的吧，我接下来该怎么做，求高手指点 |
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