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04swlcm
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[交流]
【求助/交流】同尾酶构建载体问题已有1人参与
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大家好！ 我最近做重组载体的构建，载体3.5kb，目的片段2.5kb，就是将PCR产物和载体同时BglII和BamHI双酶切（问题是设计引物的时候忽略了这两个酶是同尾酶，两端加了3-4个保护碱基），按常规酶切，连接，转化JM109后，两次都未长菌，一颗都没有？连载体自连都没有嘛？ 请问同尾酶连接需要注意什么？容易成功不？请大家多提建议哈，谢谢！ |
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