应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 为什么酶切片段大小大于预测
81/1返回列表
查看: 1128  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

593318518

新虫 (小有名气)

[求助] 为什么酶切片段大小大于预测 已有5人参与

使用酶切质粒载体得到插入片段。插入片段理论上大小为973bp，酶切完后跑1%琼脂糖凝胶，酶切片段位于1000bp之上。这是为什么了？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-05-04 09:33:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-04 23:21:24
排除本身实验问题之后，有一种解释：DNA结构可能发生变化，如发生超螺旋或者环化，电泳时，迁移率会发生变化。
赞一下 回复此楼
2楼2015-05-04 09:53:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

593318518

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-05-04 09:53:42
排除本身实验问题之后，有一种解释：DNA结构可能发生变化，如发生超螺旋或者环化，电泳时，迁移率会发生变化。

有参考文献吗
回复此楼
3楼2015-05-04 11:31:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

593318518

新虫 (小有名气)
补充一下，酶切产物有纯化，所以排除盐离子影响
赞一下 回复此楼
4楼2015-05-04 11:37:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是这样的，970bp左右的片段，胶浓度应为2%最佳，你现在是1%，而且973bp和1000bp也差不多远，所以先换个胶浓度试试
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
5楼2015-05-04 14:16:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nvs0558

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-05-04 23:21:45
这里的问题有：1. 酶切产物可能有DNA结构变化，所以难以分离；2.你的上样量有多大？如果上了很多个ug的话，也可能造成一定的漂移（你会看到类似于环状的条带）；3. 970+bp和1kb本身的差别并不是很大；个人觉得2%用于100~500bp比较好，分离970bp和1kb的话，相比1%的效果更差。 这个胶的浓度已经可以了；你可以考虑左右两边各上一个1kb和100bp的ladder，这样分辨地比较清楚。
赞一下 回复此楼
6楼2015-05-04 15:07:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
测序 可说明 一切问题  ，何必纠结于此？
赞一下 回复此楼
7楼2015-05-04 16:18:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

荣誉版主 (知名作家)

优秀版主
感谢参与，应助指数 +1
本帖仅楼主可见
赞一下
8楼2015-05-04 18:16:21
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页
相关版块跳转 我要订阅楼主 593318518 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 4/200 2026-08-08 04:07 by 6vVgjDL4CnGu
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:27 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +9 且听虎啸 2026-08-07 12/600 2026-08-07 21:53 by 理想三旬2025
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭