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湖畔狂想金虫 (小有名气)
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[求助]
求助：酶切下来的片段比PCR片段大100多bp是怎么回事，怎么解决这个问题。 已有3人参与
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我用的载体是宝生物 PMD 18-T SIMPLE VECTOR. 酶切的酶是Promega的。 PCR时，片段的位置很准确，但是和载体连完再切时，就发现切下来的片段比PCR时的大了100多。 一开始怀疑是点样的问题，于是换了1管溴酚蓝，结果仍偏大。 换用6X LOADING BUFFER ,结果略好一点点，比用溴酚蓝时小了一点，但是由于我的目的片段是693和795，即使用了6X LOADING BUFFER酶切条带仍在750mark上面。 有没有哪位前辈遇到过这种问题，求指教。 |
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