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ysn5048

银虫 (小有名气)

[求助] 目的片段中含有酶切位点,求解决方案

没人最近在克隆一段1020bp长的片段,PCR出来后已经成功连接到T载体上了,但是在做双酶切鉴定的时候发现了问题。我用的是NdeI和BamHI酶切位点,结果发现双酶切鉴定图中原有的1020的位置没有条带,反而在其下分别有两条带,加起来大概是1000左右bp,后来一查序列才发现,序列中含有BamHI酶切位点,我想请问各位师兄师姐,解决这个问题的方法只能是重新设计引物么?还有没有其他什么的方案啊?

ysn20120919双酶切鉴定T-tlip,T-hlip连接成功,.jpg
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有时候,一句话,可以改变未来
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ysn5048

银虫 (小有名气)

标注下,上图中大家只用看15kMaker之后的前四条带即可,后三条是我做的另外一个基因,那个没什么问题的
有时候,一句话,可以改变未来
2楼2012-09-19 17:03:54
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wang1127yan

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
ysn5048: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-09-19 19:57:05
ysn5048: 金币+4, ★★★很有帮助 2012-09-20 16:09:12
重新设计引物吧,设计之后再做一次试试,还是不行再想其他解决方法!
3楼2012-09-19 17:26:08
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生物-TJAB

新虫 (小有名气)

感觉也就重新引物合成最方便了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2012-09-20 23:54:31
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