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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 双酶切后目的片段变大
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策马入林

新虫 (小有名气)

[求助] 双酶切后目的片段变大

得到目的片段后连接到T载体保存，想方便以后酶切获得目的片段，双酶切后发现目的片段变大了大约1000bp怎么回事啊，请大神帮忙解答下
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1楼 2012-10-04 21:47:11
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的目的片段有多大？会不会连了两个进去？
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2楼2012-10-05 08:23:29
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ysn5048

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主有木有图啊？最好提供点更详细的信息

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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有时候，一句话，可以改变未来
3楼2012-10-05 09:04:56
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shsDerek

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你查查T载体上是不是有这个酶切位点，或者片段插错了？
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4楼2012-10-05 09:34:31
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策马入林

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-05 08:23:29
你的目的片段有多大？会不会连了两个进去？

1000bp左右，我昨晚又做了一个，感觉像没切开
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5楼2012-10-05 10:51:43
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策马入林

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ysn5048 at 2012-10-05 09:04:56
楼主有木有图啊？最好提供点更详细的信息

额，图我不会发唉
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6楼2012-10-05 10:52:02
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策马入林

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by shsDerek at 2012-10-05 09:34:31
你查查T载体上是不是有这个酶切位点，或者片段插错了？

我查过T载体上应该是有这个酶切位点的，但是应该不影响被切下来啊，我看师姐的那个也有可是可以回收到目的片段啊
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7楼2012-10-05 10:53:13
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
策马入林: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-10-06 14:09:50
引用回帖:
5楼: Originally posted by 策马入林 at 2012-10-05 10:51:43
1000bp左右，我昨晚又做了一个，感觉像没切开...

酶切后T载体部分大小对吗？如果对的话可能是连了两个进去。这种情况虽然少见，我也只遇到过一次。你的质粒应该不大，可以用单酶切验证一下质粒大小。
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8楼2012-10-05 15:48:43
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shsDerek

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

7楼说的有可能，若酶切中出问题，质粒没有被切开或者单切自连，跑一下T载体，和条带比对一下
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9楼2012-10-05 21:59:30
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小小技术官

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
直接用引物 从上面P下来 可以不
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生活是一面镜子，要笑着面对！
10楼2012-10-06 00:09:49
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