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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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策马入林

新虫 (小有名气)

[求助] 双酶切后目的片段变大

得到目的片段后连接到T载体保存,想方便以后酶切获得目的片段,双酶切后发现目的片段变大了大约1000bp怎么回事啊,请大神帮忙解答下
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的目的片段有多大?会不会连了两个进去?
2楼2012-10-05 08:23:29
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ysn5048

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主有木有图啊?最好提供点更详细的信息

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
有时候,一句话,可以改变未来
3楼2012-10-05 09:04:56
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shsDerek

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你查查T载体上是不是有这个酶切位点,或者片段插错了?
4楼2012-10-05 09:34:31
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策马入林

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-05 08:23:29
你的目的片段有多大?会不会连了两个进去?

1000bp左右,我昨晚又做了一个,感觉像没切开
5楼2012-10-05 10:51:43
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策马入林

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ysn5048 at 2012-10-05 09:04:56
楼主有木有图啊?最好提供点更详细的信息

额,图我不会发唉
6楼2012-10-05 10:52:02
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策马入林

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by shsDerek at 2012-10-05 09:34:31
你查查T载体上是不是有这个酶切位点,或者片段插错了?

我查过T载体上应该是有这个酶切位点的,但是应该不影响被切下来啊,我看师姐的那个也有可是可以回收到目的片段啊
7楼2012-10-05 10:53:13
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


策马入林: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-10-06 14:09:50
引用回帖:
5楼: Originally posted by 策马入林 at 2012-10-05 10:51:43
1000bp左右,我昨晚又做了一个,感觉像没切开...

酶切后T载体部分大小对吗?如果对的话可能是连了两个进去。这种情况虽然少见,我也只遇到过一次。你的质粒应该不大,可以用单酶切验证一下质粒大小。
8楼2012-10-05 15:48:43
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shsDerek

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

7楼说的有可能,若酶切中出问题,质粒没有被切开或者单切自连,跑一下T载体,和条带比对一下
9楼2012-10-05 21:59:30
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小小技术官

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
直接用引物 从上面P下来 可以不
生活是一面镜子,要笑着面对!
10楼2012-10-06 00:09:49
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