24小时热门版块排行榜    

查看: 1125  |  回复: 3

sunny_andy

金虫 (小有名气)

[求助] 急!要连表达载体的目的片段可以是PCR后回收的产物吗?已经连中间载体验证过了

用高保真酶PCR后,转化,验证,测序,结果都是正确的
然后双酶切回收目的片段,没回收出来
所以想着都已经验证测序了,能不能拿保存的转化子再培养后直接PCR  然后回收PCR产物  , 连接表达载体?
急!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunny_andy

金虫 (小有名气)

双酶切后 跑的电泳图表明酶切还不错  能不能用双酶切后的产物PCR 然后回收 最后连表达载体?
2楼2012-05-21 20:01:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 专家考核, 辛苦~ 2012-05-22 08:30:28
能连,但是连后要重新测序验证,这样的实验才没有漏洞。不管怎么保真性的酶,PCR都会造成突变,只是突变的几率更小而已。
3楼2012-05-21 20:14:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liujianmin68

木虫 (职业作家)

努力发展交叉学科

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
sunny_andy: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-05-22 18:53:38
同意楼上的答案,是可以连接的,PCR还用高保真酶,载体构建完成后,把你的引物也给公司,让他们给你测序看看是否发生突变,没有突变就没什么问题了。
转向地质微生物学
4楼2012-05-22 07:57:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sunny_andy 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 302求调剂 +5 呼呼呼。。。。 2026-03-17 5/250 2026-03-17 22:54 by lbsjt
[考研] 311求调剂 +9 冬十三 2026-03-15 10/500 2026-03-17 22:53 by lbsjt
[考研] 277调剂 +5 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-17 19:26 by 李leezz
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +8 一鸭鸭哟 2026-03-14 10/500 2026-03-17 15:07 by 一鸭鸭哟
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 311求调剂 +5 26研0 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:21 by a不易
[考研] 0703一志愿211 285分求调剂 +5 ly3471z 2026-03-13 5/250 2026-03-16 16:16 by 哦哦123
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +5 d如愿上岸 2026-03-12 8/400 2026-03-16 15:19 by peike
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +13 enenenhui 2026-03-13 14/700 2026-03-16 15:19 by 了了了了。。
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:05 by njzyff
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家,不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 材料专硕288分求调剂 一志愿211 +4 在家想你 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:49 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] [0860]321分求调剂,ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 工科调剂 +4 Jiang191123! 2026-03-11 4/200 2026-03-13 15:15 by Miko19
[考研] 材料301分求调剂 +5 Liyouyumairs 2026-03-12 5/250 2026-03-13 14:42 by JourneyLucky
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂! +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
信息提示
请填处理意见