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【求助/交流】胶回收后产物可以做PCR吗?
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gdongli8325
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[交流]
【求助/交流】胶回收后产物可以做PCR吗?
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因为PCR产物不是很特异(大小比较接近),而且得不到特异带,所以就进行了胶回收,但是想知道回收的条带是不是想要的条带。可不可以将胶回收产物再进行一次PCR扩增?如果可以的话,用多大浓度的胶回收产物?
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【求助/交流】DGGE 胶回收后做PCR没有条带是怎么回事??急!!!
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1楼
2010-07-31 05:21:22
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louli
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1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-31 09:23:52
你知道你的目的带是多大的吗,切胶的时候对照marker切i,回收之后跑个胶就可以了,看看是不是你的带。我们回收胶都是用1%的琼脂胶
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2楼
2010-07-31 07:50:09
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1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-31 09:24:03
可以
胶回收的产物一般稀释一下之后再扩,10~100倍都可以,根据原始条带的量以及回收率确定吧
PCR很灵敏,一点点模板就能做出来
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3楼
2010-07-31 09:08:15
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刘小乐
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用试剂盒回收之后,用先前用的引物再P一次就行了
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4楼
2010-07-31 10:24:14
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看天(金币+2):鼓励交流 2010-07-31 18:09:50
当然可以了,不过最好还是pfu产物做 模板,否则二次PCR的效果很不好
所以推荐用高保真酶,
taq则需要足够的稀释,而且还得看看运气
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5楼
2010-07-31 10:53:02
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可以做,最后测序
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6楼
2010-07-31 16:47:44
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webmasterone752
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看天(金币+1):鼓励交流 常来 2010-07-31 18:10:03
可以啊。我就这么干过 效果挺好的
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7楼
2010-07-31 18:01:42
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引用回帖:
7楼
:
Originally posted by
webmasterone752
at 2010-07-31 18:01:42
可以啊。我就这么干过 效果挺好的
那加多少合适呢
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8楼
2017-03-22 12:03:40
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