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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】胶回收后产物可以做PCR吗？
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gdongli8325

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】胶回收后产物可以做PCR吗？ 已有7人参与

因为PCR产物不是很特异（大小比较接近），而且得不到特异带，所以就进行了胶回收，但是想知道回收的条带是不是想要的条带。可不可以将胶回收产物再进行一次PCR扩增？如果可以的话，用多大浓度的胶回收产物？
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1楼 2010-07-31 05:21:22
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

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优秀版主
★ ★ ★
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看天(金币+2):鼓励交流 2010-07-31 18:09:50
当然可以了，不过最好还是pfu产物做 模板，否则二次PCR的效果很不好

所以推荐用高保真酶，

taq则需要足够的稀释，而且还得看看运气
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5楼2010-07-31 10:53:02
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louli

铜虫 (小有名气)
★ ★
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1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-31 09:23:52
你知道你的目的带是多大的吗，切胶的时候对照marker切i，回收之后跑个胶就可以了，看看是不是你的带。我们回收胶都是用1%的琼脂胶
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2楼2010-07-31 07:50:09
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
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1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-31 09:24:03
可以
胶回收的产物一般稀释一下之后再扩，10~100倍都可以，根据原始条带的量以及回收率确定吧
PCR很灵敏，一点点模板就能做出来
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3楼2010-07-31 09:08:15
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刘小乐

铜虫 (小有名气)
用试剂盒回收之后，用先前用的引物再P一次就行了
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互动互利互相学习
4楼2010-07-31 10:24:14
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