24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1154  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

sunny_andy

金虫 (小有名气)

[求助] 急!要连表达载体的目的片段可以是PCR后回收的产物吗?已经连中间载体验证过了

用高保真酶PCR后,转化,验证,测序,结果都是正确的
然后双酶切回收目的片段,没回收出来
所以想着都已经验证测序了,能不能拿保存的转化子再培养后直接PCR  然后回收PCR产物  , 连接表达载体?
急!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liujianmin68

木虫 (职业作家)

努力发展交叉学科

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
sunny_andy: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-05-22 18:53:38
同意楼上的答案,是可以连接的,PCR还用高保真酶,载体构建完成后,把你的引物也给公司,让他们给你测序看看是否发生突变,没有突变就没什么问题了。
转向地质微生物学
4楼2012-05-22 07:57:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

sunny_andy

金虫 (小有名气)

双酶切后 跑的电泳图表明酶切还不错  能不能用双酶切后的产物PCR 然后回收 最后连表达载体?
2楼2012-05-21 20:01:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 专家考核, 辛苦~ 2012-05-22 08:30:28
能连,但是连后要重新测序验证,这样的实验才没有漏洞。不管怎么保真性的酶,PCR都会造成突变,只是突变的几率更小而已。
3楼2012-05-21 20:14:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 269求调剂 +8 啊啊我我 2026-04-07 8/400 2026-04-09 19:10 by 探123
[考研] 材料专硕初试分332一志愿西北工业大学, +12 故人?? 2026-04-09 12/600 2026-04-09 18:34 by Ccclqqq
[考研] 考研调剂 +13 冰冰,,, 2026-04-07 13/650 2026-04-09 17:01 by Lilly_Li
[考研] 工科273调剂 +4 X1999 2026-04-09 5/250 2026-04-09 16:05 by wp06
[考研] 308求调剂 +17 墨墨漠 2026-04-06 17/850 2026-04-09 09:25 by 壹往無前
[考研] 求调剂 +7 chenxrlkx 2026-04-05 9/450 2026-04-09 09:04 by wj165256
[考研] 一志愿深大085601材料工程专业(专硕)300分可以调剂去哪 +16 10160315 2026-04-02 16/800 2026-04-08 19:45 by syjjj0321
[考研] 336求调剂,一志愿中科大 +9 墨彧 yuyu 2026-04-06 9/450 2026-04-08 11:24 by 想读书的菌菌
[考研] 277求调剂 +4 考研调剂lxh 2026-04-06 6/300 2026-04-08 10:40 by 逆水乘风
[考研] 331求调剂 +5 张元一 2026-04-07 6/300 2026-04-07 22:13 by hemengdong
[考研] 306求调剂 +3 15287505595 2026-04-03 3/150 2026-04-07 18:08 by 蓝云思雨
[考研] 334分机械专硕求调剂 +3 蛋花紫菜汤 2026-04-03 3/150 2026-04-07 14:49 by 逍遥cocoa
[考研] 081700,311,求调剂 +17 冬十三 2026-04-04 18/900 2026-04-07 12:50 by Sammy2
[考研] 一志愿太原理工大学计算机技术专硕348,求调剂指导 +3 nexious 2026-04-05 3/150 2026-04-07 08:19 by jp9609
[考研] 322求调剂 +3 嗯哼哼恒 2026-04-05 3/150 2026-04-05 19:52 by nepu_uu
[考研] 326求调剂 +3 顾若浮生 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:32 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358求调剂 +6 cs0106 2026-04-05 6/300 2026-04-05 16:34 by imissbao
[考研] 306求调剂 +3 hyb上名工 2026-04-02 3/150 2026-04-04 18:12 by 热情沙漠
[考研] 材料调剂 +11 吴棂颖! 2026-04-03 11/550 2026-04-04 09:56 by 小小树2024
[考研] 化工求调剂 +11 荔香芝士椰奶 2026-04-03 11/550 2026-04-03 22:06 by 啵啵啵0119
信息提示
请填处理意见